色谱分析法原理祥解.pptVIP

第三章 色谱法分析原理 概述： 色谱法的发展历程 色谱分离分析操作过程 几种色谱操作法 迎头色谱法、顶替色谱法、洗脱色谱法 色谱分离分析样品组分的过程 样品在载体“搬运”下，通过分析路径 在分析路径上，样品中的各个组分受到某种“力场” 的作用（力场可能是温度、压力、电压、光…产生可能引起分离效应，也可能不引起分离效应） 在分析路径上，发生在两相之间的分配平衡，由于各个组分在同样两相之间分配平衡有差异，从而实现各组分的分离 被分离的样品各个组分，在载体的搬运下离开分析路径，进入检测器被检测出来 假如在分析路径上样品所受到的力场是电场力，则各个组分在电场力作用下实现分离，这就是电泳 两个组分向前移动的特征 1-1迎头色谱法frontal chromatography 定义： 将试样连续地通过色谱柱，吸附或溶解最弱的组分，首先以纯物质状态流出色谱柱，然后顺次流出的是次弱组分和第一流出组分的混合物，依次类推，从而实现混合物分离的色谱法。 主要应用于非定性定量分析的领域 例如某些物理化学参数的测定、吸附剂催化剂及固体表面和孔尺寸和孔径分布等性质的研究 1-2置换法(displacement?method)? 又称顶替法，当含三种组分的混合物样品注入色谱柱后，各组分皆与固定相有强作用力，若使用一般流动相无法将他们洗脱下来，为此可使用一种比样品组分与固定相间作用力更强的置换剂（或称顶替剂）作流动相，当它注入色谱柱后，可迫使滞留在柱上的各个组分，依其与固定相作用力的差别而依次洗脱下来，且各谱带皆为各个组分的纯品。置换法现已在大规模制备色谱中获广泛应用，在生物大分子纯品制备中取得良好的效果? 顶替色谱法 (置换色谱法) 优点: （1） 样品量大产率高、被分离样品在分离过程中会自行浓缩。浓度比洗脱色谱高1—2数量级。柱载高50—100倍 （2） 可以同时分离样品中的多个组分（与亲和色谱不同） （3）被分离组分能在相当高的纯度的条件下获得高产率。 （4）各组分分离界限较清晰，拖尾少，产量和回收率高。 （5）产品浓度可控 （6）用小分子顶替剂容易与生物分子分离， （7）单位柱长固定相利用率高（和用于制备的超载洗脱和迎头分析法相比） （8）溶剂使用量少。分离时间和成本减少30%以上。 冲洗色谱法 用于定性、定量、制备分析及某些物理化学性质和过程的研究。是用途最为广泛和最为普遍的色谱法。 优点：柱效高，很容易得到几千甚至几万个塔板的分离效果、使用样品量极少、一次可以分析样品中的几个甚至几百个成分、分离分析速度极快。 色谱法应用简述 一、色谱法在定量、定性分析与制备、生产中的应用 二．色谱法在理论研究、催化化工、萃取等领域的应用 1．无限稀释活度系数数据的测定及其在工程上的应用 ①混合溶剂、②高压气液平衡系统 2．溶液理论及热数据的测定 ①过量偏摩尔参数与过量偏摩尔热容 、②溶解热、生成热、反应热、③非电解质理论、④高聚物溶液理论 3．维里系数的研究与测定 4．纯物质性质的研究与测定 ①蒸汽压、②蒸发焓、③沸点、④相变、⑤分子量、⑥分子结构、⑦熵、粘度、折光系数等 5．固体表面物理化学性质的研究 ⑴物理吸附（迎头色谱法、冲洗色谱法） ①吸附等温线、②固体表面积、③固体内含孔径分布、 ⑵化学吸附与化学滴定 ①吸附热、②固体表面的酸减性、③催化剂活性中心及其性质、 ⑶程序升温色谱法研究固体表面性质 ①?? 脱附过程、②还原与氧化、③表面反应、 6．催化反应动力学研究（微反应器反应色谱法） ①脉冲催化反应动力学、②脉冲断流色谱法、③程序升温表面反应动力学、④空穴色谱法与过渡应答技术、 7．传递性质研究 ①气体扩散系数、②液相扩散系数、③催化剂中质量传递阻力、 8．萃取过程的研究与参数测定 * ABCDE A a D C B A E ABCDE A A B C D 1-1 迎头色谱法 ABCD ABC AB A a a ABCD ABC AB A 流动方向 流出体积 B b A R A R ABR A ABR ABR BR A b 顶替色谱法(置换色谱法) D C B + C A + B 流动方向 a D C B A b A D B A C D E ABCD 顶替剂 1-3冲洗色谱法(elution?method)? 又称洗脱法，淋洗法。例如，将含三组分的样品注入色谱柱，流动相连续流过色谱柱，并携带样品组分在柱内向前移动，经色谱分离后，样品中不同组分依据与固定相和流动相相互作用的差别，而顺序流出色谱柱。? D B A+B