理化检验基础知识培训(72页)解读.pptVIP

原因:水的体积超过乙醇体积的1/4。 对策:补加95%的中性乙醇至浑浊消失； 滴定前避免带入水分。 5、实验中注意点： （1）样品处理及准备： a）要求样品有一定的细度。 b）样品要干燥无水。 （2）试剂要求： a）所使用的无水乙醚、仪器、均应无水。 b）使用过的乙醚和储存过久的乙醚可能 产生过氧化醚，这是一种具有爆炸性 的危险物质。因此，回收的乙醚应尽 快使用。必要时作检查。 （3）抽提注意事项： a）放入滤纸筒的高度不要超过回流弯管； b）加入的溶剂量不宜太多； c）检查各连接部分的气密性，如管子有 无老化等； d）抽提时间和温度的控制； e）冷凝水温度的控制。 （4）干燥注意事项： a）溶剂回收完全后放入烘箱内干燥； b）不能长时间进行干燥，否则在干燥过 程中油脂可能氧化而增重。 （四）减重法: 基本同称重法。（以滤纸包前后质量之差 计算脂肪含量） 四、蛋白测定（凯氏定氮法） （-）概述：凯氏定氮法所测得的含氮量为食品中的总氮量，其中还包括少量的非蛋白，如尿素氮、游离氨氮、生物碱氮、无机盐氮等，故由定氮法计算所得的蛋白质的量，称为粗蛋白。 （二）原理： 浓硫酸可将样品中之有机氮分解成为硫酸铵，而后经浓氢氧化钠溶液的作用，使氮素以氨气态溢出，再用2%硼酸溶液收集，然后以0.1mol/L的HcL标准溶液滴定，由滴定量与空白试验之差额，可计算出总氮量。经乘以特定的换算系数后，即为样品之粗蛋白质含量。 1、消化过程的主要反应如下： 有机物 CO2+ SO4+ NH3+ H2O 2NH3+ H2SO4 （NH4）2SO4 浓H2SO4 触媒 2、蒸馏与吸收过程的主要反应如下： （NH4）2SO4+2NaOH Na2SO4+2NH4OH 2NH4OH 2NH3+ 2H2O NH3+ 4H3BO3 NH4HB4O7+5H2O 3、滴定的过程反应如下： NH4HB4O7+HCl+5H2O NH4Cl+4H3BO3 （三）操作步骤： 1、称取适量试样于消化管中，加入一片定 氮片、3颗防沸珠及12-15ml浓硫酸。 2、将消化管置于350-400℃消化炉中加热分 解完全（约2小时），冷却后加入纯水50ml。 3、以50ml的2%硼酸溶液和2-3滴甲基红和溴 甲酚绿混合指示剂为接受液，加入60ml40%NaOH蒸馏至接受液达150-180ml。 4、以0.1mol/L标准HcL溶液滴定至终点。 （三）、实验中注意点： （1）样品的称量： a）称样量：视样品的含氮量高低而定； b）称样方式：固体样品可借助小纸片（无 氮），液体样品可用减重法； （2）样品的消化：（完全彻底，无损失） a）催化剂的种类与数量：定氮片 b）消化时间：根据消化液的颜色和透明度来 确定（透明液，约2小时）； c）消化过程中的技巧： c1）样品含脂肪较高时 可适当增加硫酸量； c2）防止样品粘附在瓶 内壁造成消化不完全： 消泡剂消除泡沫、掌握好消化的温度。 （3）蒸馏： a）蒸馏前：检查装置的密封性； b）40%NaOH添加要足量： 碱液的作用：中和硫酸，使溶液处于强碱性。 经验添加量：中和硫酸后再加40%。 如消化时加入浓硫酸10ml，则最后计算蒸馏 时加入碱的量为51.52 mL。 （3）蒸馏： c）蒸馏结束前：首先使冷凝管离开吸收 液，以防倒吸； d）用蒸馏水冲洗冷凝管外壁浸入部分。 （4）滴定： a）混合指示剂的比例应严格控制； 0.1%甲基红乙醇与0.5%溴甲酚绿 乙醇溶液等体积混合. b）标准HcL溶液的浓度需准确； c）蒸馏水的要求：不含氮。 （5）其余影响测定结果准确度的因素： a）换算因子； b）蒸馏是否完全：一般蒸馏至接收液至 150～180ml。可用以下