分子发光光谱法(福大仪器)解析：.pptVIP

第4章 分子发光光谱法 4.4 磷光光谱法 磷光发射： T1 → S0跃迁； S0 →激发→振动弛豫→内转换 →系间跨越→振动弛豫→ T1 发光速度很慢： 10-3～10 s 光照停止后，可持续一段时间 荧光发射： S1→ S0跃迁； 10-7～10 -9 s 第4章 分子发光光谱法 4.4.1 低温磷光 由于三重态寿命较长，为减小非辐射失活过程的影响，通常应在低温条件下测量磷光。 液氮是最常用的冷却剂，因而要求所使用的溶剂在液氮温度下应具有足够的黏度并能形成明净的刚性玻璃体，且对分析物具有良好的溶解特性，在所研究的光谱区内没有很强的吸收和发射，并容易制备和提纯。 第4章 分子发光光谱法 4.4.2 室温磷光 固态基质表面室温磷光分析：分析物通过物理吸附或某种化学作用力被束缚在固体基质表面，增大了刚性，减小了碰撞失活的概率，在严格干燥试样的情况下限制了氧的猝灭作用，显示室温磷光。 胶束稳定的室温磷光分析：磷光体进入表面活性剂的胶束溶液中，微环境和定向约束力发生变化，减小内转化和碰撞能量损失等非辐射失活过程概率，明显增大三重态的稳定性，使磷光强度显著增大。 敏化室温磷光分析 第4章 分子发光光谱法 4.4.3 磷光分析仪 荧光计上配上磷光测量附件即可对磷光进行测量。在有荧光发射的同时测量磷光。 测量方法： （1）通常借助于荧光和磷光寿命的差别，采用磷光镜的装置将荧光隔开。 （2）采用脉冲光源和可控检测及时间分辨技术。 室温测量时，不需要杜瓦瓶。 第4章 分子发光光谱法 4.4.4 磷光分析的应用 第4章 分子发光光谱法 4.4.4 磷光分析的应用 第4章 分子发光光谱法 4.5 化学发光分析 化学发光是由化学反应提供的能量激发物质所产生的光辐射。生物发光是指产生于生物体系中的化学发光。基于这类发光现象的分析方法，称为化学发光（或生物发光）分析法。 优点：(1). 灵敏度很高。(2). 仪器设备简单，无须光源和单色器，因而也消除了散射光和杂散光的干扰；(3). 线性范围宽；(4). 分析速度快。 局限：目前可供应用的发光体系尚有限，发光机理有待进一步研究，方法的选择性有待进一步提高。 第4章 分子发光光谱法 在化学反应过程中，某些化合物接受能量而被激发，从激发态返回基态时，发射出一定波长的光。 A +B = C + D* D* → D + h? （1）能够发光的化合物大多为有机化合物，芳香族化合物； （2）化学发光反应多为氧化还原反应，激发能与反应能相当 ?E=170～300 kJ/mol；位于可见光区； （3）发光持续时间较长，反应持续进行； 化学发光反应存在于生物体(萤火虫、海洋发光生物)中，称生物发光(bioluminescence)。 4.5.1 化学发光分析原理 * * 第4章 分子发光光谱法 分子发光的类型-按激发的模式分类： 光致发光：分子吸收光能被激发，所产生的发光：分子荧光和磷光 化学发光：分子由化学反应的化学能所激发 生物发光：分子由生物体体内的化学反应释放出来的能量所激发 分子发光分析法的特点 灵敏度高。较吸收光度法一般要高2 ~ 3个数量级。 选择性比较高。 样品量小，操作简便，工作曲线的动态线性范围宽。 4.1 荧光与磷光的基本原理 第4章 分子发光光谱法 4.1.1 分子荧光与磷光的产生 分子能级：电子能级、振动、转动能级； 基态(S0)→激发态(S1、S2、激发态振动能级)：吸收特定频率的辐射；量子化；跃迁一次到位； 激发态→基态：多种途径和方式(见能级图)；速度最快、激发态寿命最短的途径占优势； 第一、第二、…电子激发单重态 S1 、S2… ； 第一、第二、…电子激发三重态 T1 、T2 … ； 4.1 荧光与磷光的基本原理 第4章 分子发光光谱法 4.1.1 分子荧光与磷光的产生 电子激发态的多重度：M=2S+1 S为电子自旋量子数的代数和(0或1)； 平行自旋比成对自旋稳定(洪特规则)，三重态能级比相应 单重态能级低； 大多数有机分子的基态处于单重态； S0→T1 禁阻跃迁； 通过其他途径进入 (见能级图)；进入的几率小； 第4章 分子发光光谱法 4.1.1 分子荧光与磷光的产生-分子的去激发过程 非辐射能量传递过程 （1）振动弛豫：同一电子能级内以热