分子生物学第四章DNA复制：教案分析.ppt

A replication eye forms a theta structure in circular DNA. 相当于前导链的合成起始 PriA清除SSB提供引发体移动动力（ Φx 型引发体 －－后随链） oriC型引发体清除SSB？？？？？ DnaA代替了PriA、PriB、PriC和dnaT DnaB移动极性5‘→3’ PriA移动极性3‘→5’ The end-replication problem 原核生物线性DNA复制的终止机制还不清楚 末端冗余（terminal redundancy） 由许多有固定起点的 独立的复制元完成复制双向复制 Unwinding DNA from nucleosomes: 50 bp/sec, need helicases and replication protein A (RP-A) e-subunit---3’?5’ proofreading (校正) exonuclease (核酸外切酶) Both polymerases contain an a-subunit (亚单位)---polymerase Attachment of bacterial DNA to the membrane could provide a mechanism for segregation Septum-----隔膜 DNApolα是否具有引发酶活性—张玉静、阎隆飞、Molecular Biology都认为有 而孙乃恩书－－－DNA引发酶与DNApolα紧密结合-------证据是其能被50%乙二醇洗脱 PCNA: proliferating cell nuclear antigen, similar to ? subunit of E. coli pol III DNApolα可能用于起始阶段的复制（合成DNA） 复制起始的许可因子 Initiation (multiple/one times) licensing factor DNA聚合酶Polymerases (simple/complex) 进行性的DNA聚合酶有 3’?5’外切酶活性 DNApol只能从引物的3’ 端延伸DNA链增加了复制的精确性（需要RNA引物） 后随链的不连续合成有利于提高复制的忠实性因其有利于错配碱基的校正 在引发体的帮助下结合到 RFⅠDNA的复制原点的结合位点 诱导相邻的识别位点的熔解(负超螺旋、富含A/T) sigama tau DnaA forms a complex of 30-40 molecules, facilitating melting of three 13 bp AT-rich repeat sequence for DnaB binding. 引发酶产生的引物为RNA、DAN？ Licensing factor: required for initiation and inactivated after use Can only enter into nucleus when the nuclear envelope dissolves at mitosis 如图所示是一个末端结构模型。它提出存在一个由G重复单位组成的G 基四重线。图中每个连续T2G4单位的第二个G组成了这个四重线一部分，剩下的重复单位呈环状突出，G基要粒连在一起必须要改变其中两个与糖类有关的碱基的方向（从通常的反式改为不常见的顺式结构）。既然每个重复序列有不止一个G，那么如果其它G基也连在一起，则会有不止一个四重线可以形成，这些四重线可能以螺旋的形式相互堆积在一起。 ? 我们不知道端粒的互补链（富含C-A）是如何组装的，但是我们可以假设它用终止G-T发夹的3’-OH作为DNA合成的引物来合成。 是染色体的什么特点使染色体末端稳定的呢？端粒连接蛋白可以识别富含G的突出链，并且保护人体中的终止DNA，它们可能为保护人体中的端粒提供了一个“帽子”，其它蛋白质可以特异性连结重复序列区，它们的功能还有待进一步确定。 染色体的必要特征有： ◆ 保证染色体存活的端粒 ◆ 使染色体分裂的着丝粒 ◆ 开启复制的起始点（参见14章） 考虑到所有这些要素便可组成一个人造酵母染色体（YAC）。我们在20 章中提到这种染色体,它可使外来序列稳定。已发现所合成的染色体只要长于20-50kb便可以保持稳定。我们不知道这个结果的理论基础，但是合成染色体使我们可以在一个可调控条件下研究分离装置。 尺蠖－－移种爬行动物，爬行时身体呈弓形 多细胞有机体中端粒酶活性受到抑制导致细胞分裂过程中染色体逐渐缩短，当端粒缩短到一定程度时，细胞开始衰老并最终死亡 ２００３年２月１４日，英国一个名叫多