仪器-经典液相色谱法讲义.pptVIP

2.液相色谱的固定相和流动相 功能 组别分离（脱盐）：分离大小两类不同的分子即无机盐与生物大分子； 分级分离：将分子大小相近的物质分开，通常为大分子间的分离。 大分子物质中除去小分子物质时，选用交联度大的型号；小分子物质与大分子物质分离，选择交联度小的型号。 2.液相色谱的固定相和流动相 (4) 流动相 　 一般水溶性试样选择水溶液为流动相，而非水溶性试样则选择四氢呋喃、氯仿、甲苯等有机溶剂为流动相。 3.经典液相柱色谱法 硅胶吸附柱色谱是较为常用的经典液-固吸附色谱，可用于分离极性至弱极性的化合物。 3.1 硅胶吸附柱色谱 使用时，一般需经过色谱柱制备、加样、洗脱和检出四个基本步骤。 3.经典液相柱色谱法 3.经典液相柱色谱法 3.2 聚酰胺柱色谱 预处理 含有残留原料及溶剂，需水洗，丙酮、乙醇回流。干燥后研磨成细粉。 装柱 一般采用湿法装柱。 上样 洗涤和洗脱 3.经典液相柱色谱法 3.3 离子交换柱色谱 树脂溶胀 用水浸泡直至上层液透明。 装柱 一般采用湿法装柱。 树脂处理与再生离子交换树脂通常使用酸、碱进行处理，可采用1~2?mol/L的盐酸及氢氧化钠溶液，以4~6倍树脂床体积交替进行处理，可获得最佳效果。在酸及碱处理之间须用去离子水洗至中性。 上样 洗涤和洗脱 3.经典液相柱色谱法 3.4 凝胶柱色谱 凝胶溶胀 用溶剂浸泡入10倍