第五章工业微生物育种诱变剂分析报告.pptVIP

第五章 工业微生物育种诱变剂 诱变剂：凡能诱发生物基因突变，并且突变频率远远超过自发突变率的物理因子或化学物质。 第一节 物理诱变剂 物理诱变剂是指通常使用的物理辐射中的各种射线。 射线的种类 射线包括：紫外线、X射线、γ射线、快中子、α射线、β射线、微波、超声波、电磁波、激光射线和宇宙线等。 物理辐射分为电离辐射和非电离辐射，都是以量子为单位的可以发射能量的射线。 电离辐射：X射线和γ射线、快中子 非电离辐射：紫外线 辐射离我们有多远 在我们的生活环境中，辐射无处不在！ 家用电器：微波炉、吸尘器、电视、电冰箱、空调等； 办公设备：手机、电脑、复印机、电子仪器、医疗设备等 家庭装饰：大理石、复合地板、墙壁纸、涂料等 周边环境：高压线、变电站、电视（广播）信号发射塔等 自然环境：太阳黑子等 一、物理诱变剂的生物学效应 物理诱变剂对微生物的诱变作用主要是由高能辐射导致生物系统损伤，继而发生遗传变异的一系列复杂的连锁反应过程。分为物理、物理－化学、化学和生物学等几个阶段。 电离辐射主要引起DNA上的基因突变和染色体的畸变。 非电离辐射主要导致形成嘧啶二聚体。 二、辐射引起生物效应的因素 辐射引起生物学效应的强弱既决定于微生物内在遗传因素，也受外界环境条件的影响。 微生物的遗传背景 微生物的生理状态 可见光 水分 温度 空气或氧气 三、非电离辐射——紫外线 紫外线是电磁波谱中波长从0.01~0.40微米辐射的总称，不能引起人们的视觉。电磁谱中波长0.01~ 0.04微米辐射，既可见光紫端到X射线间的辐射。　　1801年德国物理学家里特发现在日光光谱的紫端外侧一段能够使含有溴化银的照相底片感光，因而发现了紫外线的存在。 　自然界的主要紫外线光源是太阳。太阳光透过大气层时波长短于290×10-9米的紫外线为大气层中的臭氧吸收掉。人工的紫外线光源有多种气体的电弧(如低压汞弧、高压汞弧)，紫外线有化学作用能使照相底片感光，荧光作用强，日光灯、各种荧光灯和农业上用来诱杀害虫的黑光灯都是用紫外线激发荧光物质发光的。紫外线还可以防伪。紫外线还有生理作用，能杀菌、消毒、治疗皮肤病和软骨病等。紫外线的粒子性较强，能使各种金属产生光电效应。 紫外线强烈作用于皮肤时，可发生光照性皮炎，皮肤上出现红斑、痒、水疱、水肿等；严重的还可引起皮肤癌。　　紫外线作用于中枢神经系统，可出现头痛、头晕、体温升高等。作用于眼部，可引起结膜炎、角膜炎，称为光照性眼炎，还有可能诱发白内障，在焊接过程中产生的紫外线会使焊工患上电光性眼炎。 目前，国内外的标准对纺织品的防紫外线性能一般都使用UPF值，即紫外线防护系数值进行评定。 UPF值是紫外线对未防护的皮肤的平均辐射量的比值，UPF值越大，表明防紫外线性能越好。 只有当UPF＞30时，并且UVA的透过率小于5％时，才能称为防紫外线产品，防护等级标识为UPF30＋； 而当UPF＞50时，则表明该产品的紫外线防护性能极佳，防护等级标识为UPF50＋。  （一）紫外线的诱变机制和DNA损伤修复 1. 紫外线的诱变机制 紫外线引起： DNA与蛋白质的交联； 胞嘧啶与尿嘧啶之间的水合作用； DNA链的断裂； 嘧啶二聚体的形成（单链上相邻两个胸腺嘧啶之间或双链相对应的两个胸腺嘧啶之间）。 紫外线可使空气中的Ｏ2分子变成Ｏ3臭氧易分解放出原子氧→强杀菌作用。 Ｏ2 紫外线 O3→ O2＋[O] 2. DNA损伤修复 包括光修复、切补修复、重组修复、SOS修复系统及聚合酶的校正作用。 （1）光复活 一般微生物中都存在光复活作用，紫外线诱变时，照射或分离均应在红光下进行。 （2）切补修复 在实际诱变工作中要采取某些措施避免暗修复，如加入某些物质，提高突变频率。 （二）紫外线诱变 1. 紫外线的有效光谱 最有效波长为253.7 nm（2537?），即260 nm的紫外线。 30W紫外灯光谱分布范围广，诱变效率差，15W紫外灯80%波长几种在2537?，诱变效果比30W的好。 2. 紫外线的辐射剂量 绝对剂量单位：erg/mm2 相对剂量单位：用照射时间或杀菌率表示。一般认为杀菌率在90%~99.9%时，诱变效果较好。 不同微生物所需杀菌时间 15W功率的紫外灯管和固定距离为30cm的条件下照射微生物，要使杀菌率达到90％～99.9％的效果： 芽孢菌约需10 min； 照射短小芽孢杆菌的营养体来获得缺陷型需要1～3 min； 一般微生物营养体照射3～5min； 无芽孢菌和革兰氏阳性菌只需0