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第三章 细胞破碎与分离过程设备 细胞破碎方法 机械法:高速珠磨机、高压均质机、超声波振荡器等。 非机械法:溶菌酶法、化学法、物理法等。 本章主要介绍机械法破碎细胞的设备。 工作原理:将进入珠磨机的细胞悬浮液与极细的玻璃珠一起搅拌,由于研磨作用,使细胞破碎,释放出内含物。 珠磨破碎过程要产生热量,易造成某些活性物质的失活,一般在磨室装有夹套冷却装置,有的需在搅拌轴上装冷却装置。 影响珠磨机细胞破碎的因素 搅拌器的转速; 细胞悬浮液的浓度; 玻璃珠的装量和珠径等; 珠体的大小应以细胞的大小、浓度以及连续操作时不使珠体带出作为选择依据。 二、高压均质机 高压均质机由高压泵和均质阀两部分组成,高压泵通常采用多柱塞往复泵。破碎阀安装在柱塞泵的排出管路上,一般由阀芯和阀座构成。 三柱塞泵 工作原理 细胞在柱塞泵的作用下经加压进入可调节压力大小的阀组中,产生三种效应: 空穴效应:被柱塞泵压缩的细胞内积聚了极高的能量,通过限流缝隙时瞬间失压,造成高能释放引起空穴爆炸,致使细胞强烈粉碎细化。 撞击效应:细胞通过可调节限流缝隙的以极高的线速度(1000米/秒,最高可达1500米/秒),喷射到用特殊材料制成的碰撞环上,造成细胞粉碎。 在工业规模的细胞破碎中,对于酵母等难破碎的及高浓度的细胞,常采用多次循环的操作方法。 一、过滤速度的强化与过滤介质 (一)过滤速度的强化 1. 加热 加热能使发酵液黏度明显降低,过滤速度加快。 2. 凝聚和絮凝 凝聚和絮凝技术能有效地改变细胞、菌体和蛋白质等胶体粒子的分散状态,使之聚集、颗粒增大,便于分离 。 常用絮凝剂:聚丙烯酸胺,聚糖、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳聚糖等。 3. 加入盐类 发酵液中加入某些盐类,可除去高价无机离子。如除去钙离子,可加入草酸钠,生成的草酸钙能促进蛋白质凝固,提高溶液质量。除去镁离子,可加入三聚磷酸钠Na5P3O10,它与镁离子形成不溶性络合物。 4. 调节pH 蛋白质一般以胶体状态存在于发酵液中。胶体状态的稳定性与其所带电荷有关。某一pH下,净电荷为零,溶解度最小,称为等电点。 5. 添加助滤剂 助滤剂作为胶体粒子的载体,均匀地分布于滤饼层中,相应地改变滤饼结构,降低滤饼的可压缩性,减小了过滤阻力。目前生物工业中常用的助滤剂是硅藻土,其次是珍珠岩粉、活性炭、石英砂、石棉粉、纤维素、白土等。 (二)过滤介质 1. 织物介质(滤布):包括由棉、毛、丝、麻等织成的天然纤维滤布和合成纤维滤布。 2. 粒状介质:有硅藻土、珍珠岩粉、细砂、活性炭、白土等。最常用的是硅藻土:化学性能稳定、多孔,表面积大。 2. 多孔固体介质 :多孔陶瓷、多孔玻璃、多孔塑料等,可加工成板状或管状,孔隙很小且耐腐蚀,常用于过滤含有少量微粒的悬浮液。 二、板框式压滤机 1. 分批式板框式压滤机 主要有固定端板、可动端板、滤板、滤筐、洗涤板、滤布、支座、支撑横梁、螺旋压紧装置等组成。 板框式压滤机的主要结构 板框排列图及滤布 滤板的作用: 正方形多孔板,角端开有小孔,两面制成沟槽,与滤出口和洗水孔道连通。支撑滤布,提供滤液流出的通道。 滤框的作用 板框式压滤机外形图 工作过程如下:过滤 洗涤 卸渣 清洗滤布 过滤 板框压滤机的特点 1、结构简单、操作容易、保养方便,所需辅助设备少; 2、对物料适应性强; 3、在发酵液过滤时每小时每m2过滤面积可处理发酵液15-25升,过滤面积选择范围广; 4、滤饼含湿量低; 5、固相回收率高,滤液澄清度好; 6、滤布检查、洗涤、更换方便; 7、过滤操作压力大(板框压滤机的最大操作压力6~10大气压,一般3~5个大气压),操作稳定; 8、造价低、投资小; 9、间歇操作,劳动强度大。 自动板筐式压滤机特点 3. 硅藻土过滤机 硅藻土由无定形的SiO2组成,并含有少量Fe2O3、CaO、MgO、Al2O3及有机杂质,具有特殊的多孔结构。 硅藻土过滤机分类: 板框式硅藻土过滤机 叶片式硅藻土过滤机 柱式硅藻土过滤机 水平圆盘式硅藻土过滤机 主要结构: A-机壳;B-原料泵;C-循环桶;D-计量泵;E-流量计;F-视镜;G-电动机;H-安全阀;L-碟形活门操作手柄;M-粗滤器;O-压力表;P-视镜;Q-清洗喷水管;1~18阀门。? 过滤机滤板结构及安装剖视 滤盘上表面是由细钢丝网形成的过滤面,作为硅藻土预涂层支撑介质; 中间层为一层粗钢丝网,作为细钢丝网的支撑层。 下表面为托盘,起接滤液的作用。 工作原理 在机壳所形成的密封腔(滤室)内装着过滤元件滤盘。滤盘水平地安装在一根空心轴上,相互间用隔圈相隔。滤网与托盘间形成的间隙与空
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