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* 第十一单元 生物技术实践 1.涵盖范围 本单元包括选修1全部内容——微生物的培养与传统发酵技术及实践应用;植物组织培养技术及DNA和蛋白质的提取与分离技术;酶的研究和实践应用;植物有效成分的提取方法、过程及注意事项。 单元教学分析 2.考情分析 考查力度:相对固定,如山东理综只出一个8分的简答题。 考查内容及形式 (1)微生物的培养与应用多以简答题形式考查; (2)酶的研究与应用,常与必修1中酶的本质、特性等知识有机结合考查; (3)植物组织培养常与植物有效成分提取相结合考查; (4)传统发酵技术及实践应用多以简答题形式考查; (5)酶的研究、DNA和蛋白质提取技术多以选择题形式考查。 3.复习指导 (1)复习线索 ①以转基因——微生物培养——酶生产——酶应用为线索,系统复习微生物培养技术、酶的研究和实践应用。 ②以技术手段、技术流程为主线,复习发酵、组织培养、有效成分及DNA、蛋白质提取有关知识。 (2)复习方法 ①列表比较法——DNA、蛋白质的提取与分离。 ②实践联系——发酵技术、植物有效成分提取技术。 ③实验联系——植物组织培养、微生物培养实验过程。 第 42 课时 微生物的培养与应用 突破考点·提炼方法 考点131  生物技术手段——微生物实验室培养 鉴别不同种类的微生物,如用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有,菌落呈深紫色,并带有金属光泽) 根据微生物的代谢特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别培养基 培养、分离出特定微生物,如培养酵母菌和霉菌,可在培养基中加入青霉素;培养金黄色葡萄球菌,可在培养基中加入高浓度食盐 允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他微生物生长 选择培养基 用 途 分类、鉴别 培养基成分明确(用化学成分已知的化学物质配成) 合成培养基 工业生产 含化学成分不明确的天然物质 天然培养基 化学成分 微生物的分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种 固体培养基 观察微生物的运动、分类鉴定 加凝固剂,如琼脂 半固体培养基 工业生产 不加凝固剂 液体培养基 物理性质 用途 特点 培养基种类 划分标准 1.培养基的类型及作用 2.培养基的配制原则和营养构成 目的要明确:根据微生物的种类、培养目的选择 不同的原料配制培养基 营养要协调:配制培养基时要注意各营养物质的 浓度和比例、pH要适宜 (1)培养基的 配制原则 (2)培养基的营养构成 ①各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。 ②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 3.配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤及注意事项 (1)步骤:计算―→称量―→溶化―→灭菌―→倒平板 (2)注意事项 ①倒平板的温度一般在50℃左右适宜,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。 ②平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 4.纯化大肠杆菌的操作过程及注意事项 (1)原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 (2)方法:平板划线法、稀释涂布平板法。 ①平板划线法:平板划线法中细菌的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的移动划线过程中。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成纯种的单个菌落。(如下图) 注意 a.划线时最后一区域不要与第一区域相连。 b.划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。 ②稀释涂布平板法 Ⅰ.系列稀释操作(图1) a.将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按101~106的顺序编号。 b.用移液管吸取1 mL培养的菌液,注入101倍稀释的试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头,吹吸3次,使菌液与水充分混匀。 c.从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液,注入102倍稀释的试管中,重复b步混匀操作。以此类推,直到完成最后1支 试管的稀释。 注意 移液管需要经过灭菌。操作时,试管口和移液管应在离火焰1~2 cm处。 Ⅱ.涂布平板操作如图2所示: 图1 图2 注意 稀释涂布平板操作复杂,各个细节均应保证“无菌”。具体如下: ①酒精灯与培养皿的距离要合适; ②吸管头不要接

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