第七章高尔基复合体与细胞分泌.docVIP

第四节 高尔基复合体与细胞分泌 名词解释：潴泡 高尔基复合体 cis网 Trans网 连续分泌 不连续分泌 分拣作用 N-连接寡糖(N-linked oligosaccharides ) 、O-连接寡糖(O-linked oligosaccharides) 一、高尔基复合体的形态结构 高尔基体顺面的网络结构（cis Golgi network，CGN），是高尔基体的入口区域，接受由内质网合成的物质并分类后转入中间膜囊。 高尔基体中间膜囊（medial Gdgi），多数糖基修饰，糖脂的形成以及与高尔基体有关的糖合成均发生此处。 高尔基体反面的网络结构（trans Golgi network，TGN），由反面一侧的囊泡和网管组成，是高尔基体的出口区域，功能是参与蛋白质的分类与包装，最后输出。 nm与内质网膜相近，大囊泡膜厚7.5-8.5nm与质膜相近。因此，从内质网→高尔基体→质膜的过程中，囊膜在逐渐地加厚，囊中成分也在逐渐的更新。 一、高尔基复合体的形态、大小和分布均有很大的差异。 二、在大多数脊椎动物细胞中，高尔基复合体为复杂的网状结构。 三、在三维空间上，由一摞封闭的紧密叠置在一起的碟形膜围扁囊构成。 高尔基体各部分膜囊具有不同的细胞化学反应：嗜锇反应，经锇酸浸染后，高尔基体的cis面膜囊被特异地染色；焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的细胞化学反应，可特异地显示高尔基体的trans面的1～2层膜囊；烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的细胞化学反应，是高尔基体中间几层扁平囊的标志反应；胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)的细胞化学反应，常常可显示靠近trans面上的一些膜囊状和管状结构，CMP酶也是溶酶体的标志酶，溶酶体就是在此处分泌产生的。min后银粒主要出现在高尔基体中，120min后位于分泌囊泡并开始从腺泡细胞顶端释放。该实验说明分泌蛋白从内质网到高尔基体的合成与转运途径。其分泌过程为： ER→出芽→小囊泡→运动→CGN→鉴别→分选→MGN→修饰加工→浓缩→包装→TGN→出芽→大囊泡→运动→质膜→外排 酶原颗粒的形成（酶原颗粒的形成顺序：）；连续分泌(continuous secretion)；不连续分泌(discontinuous secretion)；蛋白质分拣(sorting)作用 内质网驻留蛋白的回运机制： 2．对分泌部的修饰加工 1）．切割 某些蛋白前体物质需经过切割才能变成成熟分子。例如胰岛素在糙面内质网含成后，有A—B—C三个片段，进入高尔基体后期，C段切掉，再由囊泡运出细胞。胰高血糖素、血清蛋白也需要切除一段序列后才有活性。 2）．羟基化 羟基化发生在内质网或高尔基体上，通常苏氨酸、丝氨酸、酪氨酸、脯氨酸很容易发生羟基化，羟化的氨基酸残基有助于链间氢键的形成，稳定蛋白质结构。 3）．甲基化 氨基酸加上甲基具有稳定蛋白质结构的作用。 4）．酰基化 5）．糖基化 糖基化是高尔基体进行的一种最重要的修饰加工方式。经高尔基体分泌产生的蛋白（水解酶、膜蛋白、分泌蛋白）绝大多数是糖蛋白，这些蛋白通常是在内质网合成蛋白后，又在内质网或高尔基体中发生的糖基化。 蛋白质糖基化的意义：①使蛋白质折叠成正确构象，用抗生素阻断蛋白质糖基化，可使内质网合成的IgG抗体，由于缺少糖基侧链不能正确折叠而被滞留在内质网中；②增加蛋白的稳定性；③为蛋白质作标记。 在内质网和高尔基体中，蛋白质连接寡糖链的方式有二种： ① N-连接 由糖基转移酶将多萜醇的寡糖链转移到蛋白质上形成蛋白质──寡糖链，寡糖链连接连在蛋白质Asn（天门冬酰胺）侧链的氨基因N原子上。研究表明新形成的糖蛋白具有相同的糖链，它是一个由14个残糖基形成的寡糖链，其中有2个N-乙酰葡萄糖胺，9个甘露糖及3个葡萄糖，在内质网腔中这3个葡糖会很快被除去，剩下2个乙酰葡萄糖胺和9个甘露糖。如果糖蛋白去溶酶体就全切去大多数甘露糖，再加上N-乙酰半乳糖；如果糖蛋白分泌到质膜出胞，则保留大多数甘露糖，切掉少部分甘露糖，再加上半乳糖及唾液酸。通常修饰到最后剩下2个乙酰葡萄糖胺和3个甘露糖。 糖的供体为核苷糖(nucleotide sugar)，如CMP-唾液酸、GDP-甘露糖、UDP-N-乙酰葡糖胺等。糖分子首先被糖基转移酶转移到膜上的磷酸长醇（dolichol phosphate）分子上，装配成寡糖链。再被寡糖转移酶转到新合成肽链特定序列（Asn-X-Ser或Asn-X-Thr）的天冬酰胺残基上。O-连接是在羟基化的基础上，由糖基转移酶催化，使蛋白质上酪氨酸、丝氨酸、苏氨酸、脯氨酸侧链的羟基与寡糖共价结合形成O-连接的寡糖糖蛋白。 6）．磷酸化 溶酶体中有几十种酸性水解酶，这些酶需要进行磷酸化，带上磷酸基，蛋白质和酶的磷酸化与去磷酸化是一个重要的生化过程，它是一种分子开关，控制