选修微生物的利用分析报告.pptVIP

2.微生物接种方法 (1)平板划线法:平板划线法中细胞的分离和稀释过程发生在接种环在固体平板表面上的划线和移动过程中。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成纯种的单个菌落。(如图所示) P193 (2)稀释涂布平板法:10倍系列稀释操作。 ①将分别盛有9 mL水的6支试管灭菌,并按101～106的顺序编号。 ②进行梯度稀释后,从菌落开始,每次取前面1 mL溶液注入到下一试管中混匀。(如图所示) ③进行涂布平板操作。 P193 【高考警示】 (1)两种接种方法作用不完全相同:平板划线法和稀释涂布平板法都能使细菌纯化,但平板划线法不易分离出单个菌落,不能计数;稀释涂布平板法能使单菌落分离,便于计数。 (2)稀释涂布平板法的缺点:稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。 P194 (3)平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同: ①第一次操作:杀死接种环上原有的微生物。 ②每次划线之前:杀死上次划线后接种环上残留的菌种,使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端。 ③划线结束后:杀死接种环上残存的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。 P194 【典例2】从自然界微生物中筛选某菌种的一般步骤是:采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。 (1)不同微生物的生存环境不同,获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样,然后再按一定的方法分离、纯化。培养嗜盐菌的菌种应从　　　　环境中采集。 (2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件,使其菌落中的数量大大增加,从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择 的培养基,并在　　　　条件下培养。 海滩等高盐 以淀粉为惟一碳源 高温 P194 (3)接种前要对培养基进行　　　　处理。在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在　　　　条件下进行。 (4)如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图,请分析接种的具体方法。 高压蒸汽灭菌 无菌 P194 获得图A效果的接种方法是　　　　,获得图B效果的接种方法是　　　　。一同学用稀释平板法纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是　　　,应当怎样操作才可避免此现象?　　　　　。 (5)如果探究温度对纤维素酶活性的影响,自变量是　　　,应该保持　　　　　　等不变(至少答两项)。 稀释涂布平板法 平板划线法 菌液浓度过高 增大稀释倍数(或培养过程被杂菌污染　严格无菌操作) 温度 纤维素的量与浓度、反应时间、pH P194 考点三 微生物的筛选与计数 1.筛选菌株 (1)原则:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。 P194 (2)菌株筛选原理的比较: ①选择培养基的成分:纤维素作为惟一的碳源 ②鉴定方法:刚果红染色法,即刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 ①选择培养基的成分:尿素作为惟一的氮源 ②鉴定方法:在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,pH升高,说明细菌能分解尿素 分解纤维素的微生物 土壤中分解尿素的细菌 P194 CO(NH2)2+H2O 2NH3+CO2 脲酶 用伊红美蓝培养基鉴别大肠杆菌，大肠杆菌菌落呈现黑色 2.统计菌落数目的方法 (1)显微镜直接计数法: ①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量。 ②方法:用计数板计数。 ③缺点:不能区分死菌与活菌。 P194 (2)间接计数法(活菌计数法): ①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。 ②计算公式:每克样品中的菌株数=(C÷V)×M,其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。 ③操作:设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 P194 3.设置对照 (1)目的:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 (2)方法:①证明培养基未被污染,用空白培养基作对照。 ②证明选择培养基的选择作用,用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。 P194 专题2　微生物的利用 P191 P191 一、微生物的实验室培养 1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其 _________的营养基质。 (2)营养构成:一般都含有__