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第六小组 徐丹:资料文献收集、撰写实验、讨论 雷维:资料文献收集、撰写实验、讨论 陈果:PPT制作、讨论 龙囿秀:PPT制作、讨论 碳酸饮料中的苯甲酸钠 毒理学实验设计 苯甲酸钠 别名:安息香酸钠 化学式:C6H5CO2Na 分子量:144 理化性质:无色、无味片状晶体 化学结构: COONa 食品工业用作食品防腐剂,用于酱油,醋,低盐酱菜,果汁,果酱,果酒,罐头食品,汽水,饮料糖浆,烟草等的防腐. 医药工业用于制备安钠咖镇静剂等药物及用于中药丸糖浆的防腐. 制造染料工业的媒染剂,塑料工业的增塑剂以及用作香料工业的原料. 作为化学试剂,用作血清胆红素试验的助溶剂. 还用于防锈纸,乳胶漆,鞋油,胶水,织物的防腐和防霉. 1、实验目的 2、实验原理 3、材料与方法 4、剂量设计与分组 5、操作步骤 6、实验结果——LD50 7、分析结果 8、文献 实验目地 1.掌握经口染毒急性毒性实验方法 2.求出苯甲酸钠对大鼠的半数致死剂量(LD50)以初步估计苯甲酸钠对人类毒害的危险性 3.观察苯甲酸钠对动物急性毒性作用机理及中毒反应特征、解剖大鼠研究其作用靶器官 4.阐明苯甲酸钠的剂量—反应关系并绘制量效反应关系曲线 实验原理 苯甲酸钠亲油性较大,易穿透细胞膜进入细胞体内,干扰细胞膜的通透性,抑制细胞膜对氨基酸的吸收;进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储,并抑制细胞的呼吸酶系的活性,阻止乙酰辅酶A缩合反应,从而起到食品防腐的目的。 苯甲酸钠的急性毒性较弱,但其在人体胃肠道的酸性环境下可转化为毒性较强的苯甲酸,在人体代谢中通过CH6H5CO2H + OH- ? C6H5CO2- + H2O来调节人体PH,有可能引起胃肠功能减退,但人体在本身的代谢中可以产生这类物质,而多余的还要在肝脏中处理并排泄出去,增加了肝脏的负担。 材料与方法 1.材料 1.1大鼠48只,雌雄各半(室温,自由饮水摄食),鼠笼,鼠粮 1.2受试化合物:苯甲酸钠 1.3器材:灌胃针、酒精棉、100ml容量瓶若干、烧杯、分析天平 2.方法 2.1选取大鼠随机分组8-10只动物(雌雄各半) 2.2动物编号,称重记录 2.3大鼠经口染毒 剂量设计与分组 剂量设计:先查文献中受试化合物中受试化合物的LD50,以3倍之差的三个剂量组进行预实验,每组3只动物,求出动物全活、全死剂量;在全活-全死剂量之间设5~6个剂量组,各组间距1.2~1.5等比级数设计 剂量分组:查阅相关资料得到:口服- 大鼠LD50=4070mg/kg; 口服-小鼠LD50=2150mg/kg,将4070mg/kg安排在在第二组与第三组之间,设置1.5倍组距,分为4个剂量组,并计算出各剂量组浓度如下: ? 表1 苯甲酸钠各剂量组浓度 剂量组 1 2 3 4 剂量(mg/kg) 1808 2713 6015 9157 根据1ml/100g的大鼠灌胃量,计算4个剂量组的灌胃药物浓度,并配置出相应浓度的试液。 表2 各剂量组 含药量计算方法:(以1808mg/kg为例) 1ml/100g → 10ml/kg 1808mg/10ml → 1.808g/10ml 1808mg/kg 剂量组 阴性对照 1 2 3 4 阳性对照 剂量(mg/kg) 药量(g/10ml) 0 0 1808 1.0808 2713 2.713 6015 6.015 9157 9.157 LD100 ? 步骤 操作 大鼠编号称重、随机分组 计算灌胃量 大鼠灌胃 观察并记录大鼠中毒反应症状 死亡动物解剖观察,记录病理变化 实验结果及数据分析 急性毒性实验原始记录 中毒症状:主要表现为震颤、出汗、共济失调、抽搐、畏光、呼吸紧促,死前表现为抽搐、呼吸困难,个别会出现口角出血。 动物编号 性别 体重 染毒量 染毒时间 体征及出现时间 死亡时间 ? ? ? ? ? ? ? 73% 82.1% 78.42% 表4 各剂量组大鼠死亡情况 组别 剂量(mg/kg) n 死亡数 p q p·q 阴性对照 1 2 3 4 阳性对照 0 1808 2713 6015 9157 LD100 ? ? ? ? ? ? ? Σp= ? ? ? ? ? ? ? Σp·q= 73% 27% 82.1% 17.9% 78.42% 21.58% 急性毒性分级标准 级别 大鼠口服 LD50/(mg/kg) 相当于人的致死剂
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