基因治疗2要点分析.pptVIP

1990年，布利和安德森等人进行了世界上首次人体基因治疗的临床试验，他们用无害的病毒作为载体，将能产生腺苷脱氨酶（ADA）的健康基因导入患者体内的细胞中，用于治疗由于基因缺陷而无法合成具有分解氨基毒素功能的ADA的4岁女孩，获得了初步治疗果。 重点：遗传病（如血友病、地贫、囊性纤维病、家族性高胆固醇血症等）、恶性肿瘤、心血管疾病、感染性疾病（如艾滋病、类风湿等），而且以恶性肿瘤为基因治疗研究的重点对象。 欧盟委员会（EC）已批准了西方世界首个基因治疗药物Glybera，该药来自一个很小的荷兰生物技术公司uniQure，标志着修复基因缺陷的新颖医疗技术的一个里程碑。该药用于治疗一种极其罕见的遗传性疾病——脂蛋白脂肪酶缺乏症（LPLD），预计每名患者的花费将高达120万欧元（约合160万美元），该药将创造昂贵现代医药的新纪录 具体策略： 1、基因矫正：对异常基因在原位进行修复，理论上的理想方式。 2、基因置换：同源重组的方式将正常基因取代变异基因，困难在于体内同源重组的频率很低 3、基因增补：将正常的目的基因输入病人体内，以补偿缺陷基因的功能或调整细胞的某些功能 4、基因失活：反义核酸、核酶、DNA三链技术、RNA干涉和基因敲除（gene knock-out） 5、免疫基因疗法：DNA疫苗，免疫因子基因导入 6、活化前体药物基因疗法 （“自杀基因” ）：如单纯疱疹病毒胸苷激酶（HSV-TK），催化核苷酸类似物(丙氧鸟苷)磷酸化为有毒中间物，阻断DNA合成 7、化疗保护性基因疗法：多药抗性基因（MDR-1）导入骨髓干细胞 治疗性基因的选择 目的基因分类： 直接选择缺陷基因的正常基因，如选择腺苷脱氨酶治疗重症联合免疫缺陷综合征（SCID） 间接治疗作用的基因：细胞因子基因、自杀基因、多药抗性基因等 目的基因来源： 基因克隆、人工合成和PCR扩增 性细胞基因治疗（Germline gene therapy）:是在生殖细胞中进行操作，改变生殖细胞的程序，这些细胞能将改变传递给下一代，使其后代从此再不会得这种遗传疾病。 伦理学问题？ 体细胞基因治疗（Somatic gene therapy）:是在体细胞中进行基因操作，以改变身体已分化细胞DNA的程序，但这些细胞没有能力将这种改变传递给下一代，其子孙后代仍会患这种病。 人类体细胞基因治疗方法: 体外法（ex vivo）：将病人的细胞取出，在体外加入正常基因校正细胞，再将校正后的细胞放回到病人体内，使新的功能得到表达。 原位法（in situ）：将新基因直接引入病人疾病部位（如癌块、心肌等），可用病毒宿主或裸露的DNA引入。 体内法（in vivo）：将宿主注入血流，将治疗性基因以安全有效的方式带至组织，目前尚未研制成功。 基因治疗新进展 * * * * * 三、基因干预 Gene Interference 主要干扰特定细胞的mRNA转录和翻译 基因干预的种类： 1.反义RNA (antisense RNA) 2.干扰RNA (RNA interference) 3.核酶 (ribozyme) （一）反义RNA 1. 反义RNA与基因表达调控 利用反义RNA对体外培养的细胞进行基因表达调控，通常采用的方法有两种： （1）体外合成反义RNA，直接作用于培养细胞，细胞吸收RNA后，发挥作用。 缺点：RNA易降解 （2）构建能转录反义RNA的重组质粒，将质粒转入细胞，转录出反义RNA而发挥作用 缺点：细胞内转录的反义RNA量不易控制 反义基因治疗 DNA DNA  RNA RNA 反义RNA