课堂报告：生物强化技术及应用(赵翠)资料.pptVIP

生物强化技术及应用 环境科学与工程 赵翠主要内容 生物强化的概况 高效菌种的制备 工艺的调控 生物强化主要的技术方法 生物强化的工程应用 讨论与展望 生物强化的基本原理 生物强化技术（Bioaugmentation，BA技术），是向污染物处理系统中投加特殊的菌种，去除某一种或某一类有毒有害、难降解的有机物，以保持和提高系统的处理效率。 传统分离、纯化、 富集及发酵生产 利用现代分子生物 技术设计与生产的 工程菌 投菌法：向处理系统投 加具有特异降解性的高 效菌剂 固定化技术：将高效菌 或酶固定于载体，再投 入处理系统 菌剂的研发 工艺的调控 生物强化技术菌剂的研发 异形生物质条件下优势菌种的筛选 外部的选择压力(异形生物质) 驯化培养 分离（稀释涂平板法、倒平板法等） 纯化（平板划线法） 富集培养（发酵） 分子遗传育种（原生质体、基因工程） 将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作改变物种的遗传特性基因工程 原生质体育种 原生质体融合，跨越不同种属的遗传障碍，使菌株具有两套以上亲本的遗传基因。 对数生长早期菌株 溶菌酶 原生质体 融合 物 理 激光融合 超声融合 电融合 化 学 pH诱导 生 物 紫外灭活 病毒膜片 融合质体 筛选 抗性互 补筛选 荧光染 色筛选 目的融合质体 应用： 黑曲霉M70（酸性蛋白酶）与米曲霉 M4（中、碱性蛋白酶和淀粉酶）融合 提高了降解淀粉、蛋白的能力（王建华 ，2007） 酵母菌与降解苹果酸裂殖酵母属间融合 提高了其发酵能力（丁朋晓 ，2007） 基因工程育种 转化　游离的DNA分子　适应环境 转导　病毒噬菌体　广泛性、特异性 接合　可移动遗传因子（质粒、 转座子） 　革兰氏阴性菌较多见，阳性菌有链酶菌、放线菌、分枝杆菌 应用： Burkholderiacepacia G4，芳香族化合物的存在共代谢三氯乙烯（TCE） 插入Tn5，直接表达降解TCE的邻甲苯单氧化酶（Winker J ，1995） 将Alicaligenes eutrophus JMP134菌，含有质粒 pJP4，携带降解2,4- 二氯苯氧基乙酸(2,4-D)基因产生抗汞性能 转入土壤，产生接合子，含有质粒 pJP4 ，携带降解2,4- 二氯苯氧基乙酸(2,4-D)基因产生抗汞性能（Digiovanni GD，1996） 目前应用广泛的商品化菌剂 生产厂家 产品 应用领域 爱尔兰生化试剂有限公司 Biolyte 系列 有机废水、肉类及乳品加工废水、纸浆、工业废水处理 美国俄亥俄州环境科学总公司 IMO 城市污水处理 美国艾尔克蒙公司 Alken Clear - Flo 动物粪便中的纤维、蛋白、脂肪和剩余的碳水化合物处理 美国普罗生物技术有限公司 Probiotic Solution、Huma Gro系列 工业废水处理、河道及湖泊景观水生态治理、土壤修复及农业、园艺 Zebec Systems公司 Z - BIO 系列 农业污水、水产业污水、工业废水、市政污水、石化废水处理 休斯顿生物环境技术有限公司 优质的细菌合成产品 除臭、清洁阴沟、处理油脂和石油污染 日本琉球大学 EM 农牧、养殖、工业、环保、医疗、日常生活废水处理 香港以诺集团 Enochem 系列 环保、生态农业、畜牧水产养殖业废水处理 上海英普环保技术有限公司 BiNutrix - ww 工业废水处理 微生物与基质间的作用 优势菌种直接作用 共代谢基质协同作用 基质 酶 高效微生物 ＡＴＰ ＡＴＰ 基质 高效微生物 酶 生长基质 酶 高效微生物 酶 ＡＴＰ 微生物在水处理系统中的存在形态 游离悬浮状态-竞争生存，易流失 接触固着生长-固定在膜表面的生物更稳定、增加了细胞膜的接触时间 质粒结合的最佳环境象是琼脂平板和滤膜表面 （Angles ML, 1993） 固定化方法 吸附法(载体结合法)、包埋法、交联法(架桥法)、无载体固定化技术 固定化技术 吸附法— 包埋法— 交联法— 无载体固定化— 非水溶性载体 物理吸附，化学或离子结合 高分子微小网格 物理截留 交联剂官能团与细胞表面氨基、羟基 共价键结合 碎石、卵石、煤渣、焦碳、硅藻土、多孔砖、石英砂、硅胶、沸石、活性炭 聚乙烯醇(PVA)、聚丙烯酰氨(ACAM)、聚乙烯乙二醇(PEG)、 琼脂、海藻酸钙、角叉菜胶等凝胶 几丁质、N,N/-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA ） 微生物自絮凝 几种微生物固定化载体的性能 指标 琼脂 海藻酸钙 角叉胶 聚丙烯酰铵（ACAM） 聚乙烯醇（PVA） 压力强度（Kg/cm2） 0.5 0