2.2.2土壤中分解尿素的细菌的分离和计数课件.pptVIP

课题背景 尿素是一种重要的农业氮肥。但是尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成氮之后，才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。 尿素最初是从人的尿液中发现的。 1828年，德国化学家维勒成功地通过无机物的化学反映合成了尿素，揭开了历史上人工合成有机物的新篇章。 研究思路 筛选菌株 PCR的自动化需要耐高温的 DNA聚合酶，这种酶要能忍受93℃左右的高温。 科学家从水生耐热细菌Taq中分离到耐高温的Taq DNA 聚合酶。 为什么Taq 细菌能从热泉中被筛选出来呢？ 因为热泉70--80℃的高温条件淘汰了绝大多数微生物，而使耐高温的Taq 细菌脱颖而出。 实验室微生物的筛选原理 应用筛选 Taq 细菌的原理，人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 统计菌落数目 常用稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目。样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为保证结果准确，一般选择菌落数30—300的 平板计数。 设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 实验室微生物的筛选原理 应用筛选 Taq 细菌的原理，人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。 * 学习目标： 1、明确培养基对微生物进行选择的原理。 2、学会统计微生物数量的方法。 尿素 问题探讨： 1、从土壤中分离自养型微生物用什么培养基？ 2、从土壤中分离固氮微生物用什么培养基？ 3、从土壤中分离出分解尿素的细菌用什么样的培养基？在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是什么物质？ 4、如果想分离出能分解石油的微生物，应该用什么培养基？ 培养基上的菌落 2、某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为23.4，那么每毫升样品中的菌株数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0.2ml）______。 3、用这种方法测定密度，实际活菌数量要比测得的数量______，因为___________________________________________。 4、某同学在测定大肠杆菌的密度时发现，在培养基上还有其他杂菌的菌落，能否肯定该大肠杆菌的品系被污染了？为什么？ 1.17×108 多 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 答：不能。因为杂菌可能来自培养基或来自培养过程。