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* 西南农业大学 * 并发性导(co-sexduction): 是建立遗传图的另一手段,两个位点必须密切 相连才能处在同一个F 因子上。 获得两个位点间重组率 ? 每个片段的连锁群。 性导作图法与转导作图法相同。 * 西南农业大学 * 1. 概念:是指以噬菌体为媒介进行细菌遗传物质重组的 过程,是细菌遗传物质传递和交换方式之一。 2. 特点: 以噬菌体为媒介 ? 细菌的一段染色体被错误地 包装在噬菌体的蛋白质外壳内 ? 通过感染转移到另 一个受体细胞内。 ∵ 感染细菌的能力决定于噬菌体的 蛋白质外壳。 四、转导(transduction): * 西南农业大学 * 3. 例如: 黎德伯格与津德(1951)发现鼠伤寒沙门氏菌中转导现象。 ⑴. 将两个沙门氏菌的营养缺陷型进行杂交: phe- trp- tyr- met+ his+ × phe+ trp+ tyr+ met- his- ↓混合培养 在基本培养基发现原养型的菌落 频率为1/105 * 西南农业大学 * ⑵. 产生上述结果的原因: ①.是否属于恢复突变? 高频率出现不可能是回复突变。 ②.是否属于接合、性导? 戴维斯U型管试验 (防止细胞直接接触) ? 结果也获得野生型 重组体,排除由于接合或性导而产生基因重组可能性。 ③.是否属于转化? 结果表现为不受DNA酶的影响,排除了由于DNA片断通过滤片 经转化实现基因重组可能性。 ⑶. 唯一可能的结论是:这种重组通过一种过滤性因子实现。 这种过滤性因子称为FA,不受DNA酶的影响。FA为噬菌体 P22(溶源性)。 * 西南农业大学 * ㈠、普遍性转导: 转导颗粒 同源重组 错误包装(1/1000机率) 转导颗粒:把细菌染色体片段包装在噬菌体蛋白质外壳内而产生 的假噬菌体,其中并不包含噬菌体的遗传物质。 1.作用:可转导细菌染色体组的任何部分。 * 西南农业大学 * 以普遍性转导噬菌体 P1为例,测定大肠杆菌的 leu(亮氨酸合成)、 thr (苏氨酸合成)、 azi(叠 氮化钠抗性)三个基因的 顺序。 2.测定细菌基因间的连锁关系: 噬菌体P1 大肠杆菌 leu+、thr+、azi+ P1后代 含转导颗粒 大肠杆菌 leu-、thr-、azi- 侵染 侵染 释放 * 西南农业大学 * 基本培养基2 azi?,leu+ 整合thr+ 细菌生长 azir 与azis个数 leu+与leu–个数 受体菌特定培养(接上图) 基本培养基1 azi?,thr+ 整合leu+ 细菌可生长 azir 与azis个数 thr+与thr–个数 基本培养基3 azi? Leu+ thr+ 细菌生长 azir 与azis个数 * 西南农业大学 * 三个位点之间的连锁关系: 实验1: 2种可能排列: azi leu thr leu azi thr 实验2:肯定三个基因的顺序是: azi leu thr 实验3: 证明这一顺序,因为leu+和thr+片段之间从未携带有azir。 ? 每个选择的标记基因进行多次试验: 实验 选择的标记基因 未选择的标记基因频率 1 leu+ 50%azir 2%thr+ 2 thr+ 3%leu+ 0%azir 3 leu+ thr+ 0%azir * 西南农业大学 * 通过合转导关系求出两基因之间的物理距离: 由以上公式可知: 转导DNA的平均长度约为1个病毒基因组的大小; 通过试验测知两个基因的合转导频率,就可估算出两个 基因间的物理距离。 * 西南农业大学 * 不正常的环出: 携带出部分细菌染色体区段的噬菌体,又叫特殊性转导颗粒。 裂解起始: 正常环出。 溶源起始: 在染色体的 特定位点整合。 ㈡、特殊性转导:由温和噬菌体进行的转导。 * 西南农业大学 * 重组性转导: 再次整合: 导致溶源 性转导。 特点:转导仅限于靠近原噬菌体附着点的基因。 * 西南农业大学 * 以λ噬菌体为例:λdgal颗粒形成过程: ? * 西南农业大学 * 噬菌体的侵入,导致重组性转导。 * 西南农业大学 * 应用中断杂交技术、重组作图、转化和转导 相结合?细菌非常详细 的
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