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RNA干扰实例 体内注射siRNA/shRNA/vshRNA 电转 病毒感染 体外灌注 siRNA传输至特定靶细胞 皮下注射 静脉灌注 鼻腔给药 气管给药 胚胎干细胞; 肝细胞分离 膜内,小脑,皮下,肌内给药 RNAi载体质粒测序中断（包括常规的shRNA载体和病毒vshRNA载体） 原因 解决方案 RNAi实验后目的基因水平反而上调 原因 解决方案 RNAi实验后细胞死亡，无法进行多功能学的实验和检测 原因 解决方案 RNAi实验后细胞死亡或者停止生长，无法进行稳定株筛选 原因 解决方案 RNAi实验后，无法进行长期稳定株筛选，传代2-3次后RNAi效应逐渐消失 原因 解决方案 RNAi整体动物实验失败 原因 解决方案 慢病毒在吉凯实验室和客户实验室感染效率差异，MOI差异 原因 解决方案 RNAi实验的不稳定性（干扰效率不稳定，功能读出值不稳定，影响部分干细胞分化特性） 原因 解决方案 感谢您对吉凯基因的关注与支持 非常荣幸与您探讨解决实验问题 地址：上海张江高科技园区蔡伦路720弄1号楼517室 邮编：201203 电话：86-21 800-720-0302 传真：86-21 网址： Email：service@ 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * * * * * * * * * * * * * * 吉凯基因RNA干扰实验技术课程培训 2007年11月 中国 武汉 2006年10月2日，瑞典卡罗林斯卡医学院宣布，将2006年诺贝尔生理学或医学奖授予两名美国科学家安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛，以表彰他们发现了RNA干扰现象。 RNA干扰技术简介 RNA干扰(RNA interference，RNAi)是正常生物体内抑制特定基因表达的一种现象，它是指当细胞中导入与内源性mRNA编码区同源的双链RNA(double stranded RNA，dsRNA)时，该mRNA发生降解而导致基因表达沉默的现象，这种现象发生在转录后水平，又称为转录后基因沉默(post-transcriptional gene silencing，PTGS)。外源dsRNA 进入细胞后产生的小分子干扰RNA（small interfering RNA, siRNA）的反义链和多种核酸酶形成了沉默复合物(RNA-induced silencing complex，RISC)，RISC具有结合和切割mRNA的作用而介导RNA干扰的过程。RNAi具有特异性和高效性。这种技术已经成为研究基因功能的重要工具，并将在病毒病、遗传性疾病和肿瘤病的治疗方面发挥重要作用。 What’s RNAi 双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达，诱使细胞表现出特定基因缺失的表型，称为RNA干扰（RNA interference， RNAi）。 RNA干扰具有普遍性、高效性、特异性的特点 2006年诺贝尔生理学或医学奖授予两名美国科学家安德鲁·菲尔和克雷格·梅洛，以表彰他们发现了RNA干扰现象。 RNA干扰技术的应用 RNA干扰的最大潜能在于它可以在几天内选择性的关闭几乎每一个基因，并且只是关闭特定的基因，因此它比以往任何一项技术都更适合用于： 基因功能研究 药物靶基因筛选 药物靶点验证 实验室简介-已有技术平台和基因资源 技术平台： ①高效siRNA化学合成技术平台（2003年）； ②基因作用靶点快速筛选技术平台（2004年）； ③药物作用靶点快速筛选技术平台（2004年） ； ④全长基因克隆技术平台（2004年） ； ⑤慢病毒、腺病毒、快病毒的构建、包装和