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移行RNAi 移行RNAi是指沉默信号沿特定基因的移动。即沉默信号沿特定的mRNA由3’ 5’方向移动，这就是“移行RNAi”。在移行RNAi中新生成的siRNA并非直接来自导入的dsRNA，而是在细胞中RdRP的作用下，以初级siRNA的反义链为引物，以靶mRNA为模板，生成dsRNA，随后在Dicer酶及ATP的作用下产生新的siRNA，称为次级siRNA。除RdRP通过产生次级siRNA参与RNAi信号扩增外，其他与RdRP具有同源序列的蛋白类似物也通过相同的方式产生次级siRNA参与沉默信号的扩增。 此外，RNAi的扩增效应还可能存在另外两种机制： (1) Dicer将长dsRNA切成初级siRNA，这一放大水平取决于dsRNA的长度；(2) siRNA在酶的作用下可以多次应用，产生进一步的放大效应。 应用： RNAi主要通过在转录后 （post-transcriptional）水平阻断基因的表达，导致蛋白无法合成，出现“基因沉默”。比如，我们可以按拟定的方式来关闭（shutting off）非必需或致病基因的功能。从理论上说，若能关闭致病基因的表达则很多疾病将被治愈。动物实验已证明，可以通过RNAi的方法使导致血胆固醇升高的基因“沉默”；病毒性疾病，眼疾，心血管代谢性疾病等方面的临床试验也正在进行中；这一方法为病毒性肝炎、艾滋病和肿瘤等人类顽疾的治疗指了一条新路 。 药物开发 RNAi的应用领域 病毒性疾病的治疗 基因功能研究 2 4 1 肿瘤治疗 3 1）基因功能研究 由于RNAi技术可以利用siRNA使目的基因沉默，研究基因的功能。同时siRNA表达文库构建方法的建立，使得利用RNAi技术进行高通量筛选成为可能，对阐明信号转导通路、发现新的药物作用靶点有重要意义。  2）病毒性疾病的治疗 RNAi 机制作为真核生物基因组免疫系统, 抑制外源和内源有害基因表达。利用RNAi 技术把与病毒基因具同源性的siRNA 引入感染细胞将会抑制病毒的增殖。利用RNAi 技术抑制过度表达的癌基因将会使癌症表型逆转或病程得以控制。 研究人员开发出使用RNAi技术来阻止艾滋病病毒进入人体细胞。这个研究小组设计合成的lenti病毒载体引入siRNA，激发RNAi抑制了HIV-1的coreceptor(辅助受体)-CCR5进入人体外周Ｔ淋巴细胞，不影响另一种HIV-1的coreceptor-CCR4，从而使以lenti病毒载体为媒介引导siRNA进入细胞内产生了免疫应答，由此治疗HIV-1和其他病毒感染性疾病的可行性大大增加。 。 Randall等证明了针对 HCV(丙型肝炎病毒) RNA的siRNA转染细胞4天后可使细胞质中复制的 HCV RNA降低80倍；将siRNA 转染至已有HCV感染、复制的细胞，siRNA对98%以上可检测到HCV抗原、HCV复制活跃的细胞有抑制作用；siRNA干扰沉默 HCV RNA具有剂量依赖性和序列特异性。Kapadia等也证明了siRNA特异抑制 HCV RNA复制、阻止相关蛋白表达的作用。 Fig3.RNAi的抗病毒机制 3）肿瘤治疗 用RNAi特异性地抑制癌基因、癌相关基因或突变基因的过度表达，使这类基因保持在静默或休眠状态，从而有望用这种新的手段治疗各种恶性肿瘤。 (1)RNAi可应用于敲除点突变激活的癌基因， (2)RNAi可应用于抑制插入基因及融合基因的表达， (3)RNAi可应用于抑制基因扩增。 4）药物开发 。利用RNAi技术来研究药物作用的特异性和机制对于加快药物开发的研制速度大有益处，因为基因组研究成果和高通量的筛选技术，为更好更快发现药靶和候选药物提供了重要基础。在药物开发过程中，用RNAi技术可以对靶基因的功能进行分析，有助于搞清药物的作用机制以及与基因编码产物，及与相应化合物的相互作用，从而更正确地发现药靶，开发更有效的候选药物 RNA干扰存在的问题 目前siRNA导入胞内的效率低下，如何有效将siRNA转移入体内成为RNAi应用的最大障碍； 如何在目的基因序列上选择21-23nt左右的序列作为siRNA 的模板，从目前的研究来看，序列的选择原则尚不清楚； 目前RNAi 机制尚未完全阐明，尤其在哺乳动物细胞中的研究报道不多。 siRNA的稳定性 在多基因家族中的非特异性问题 如何将RNAi技术运用到临床试验 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培