第四章酶的分子修饰资料.ppt

* * * * * * 因此,先用标准的单抗制备法获得具有谷胱甘肽( GSH) 结合部位的单抗(4A4 IgG) ,再用苯甲基磺酰氟( PMSF) 活化Ser 的羟基,相继以氢化硒(H2Se) 处理,则将单抗结合部位上的Ser 突变成硒代半胱氨酸(SeCys) ,因而在单抗结合部位上引入了酶的催化基团。这样,单抗的结合部位上既有底物结合部位,又有催化基团,因而会显示出GPX活性,且其活力已达到天然GPX 的数量级水平。 目前,该小组通过对半抗原的修饰,用同样的方法已得到活力分别为兔肝GPX 活力的116 倍和815 倍的含硒抗体酶。 * 固氮酶的活性中心—FeMo辅基是由2个缺口的立方烷型[Fe_4S_3]簇和[MoFe_3S_3]簇. 含硒抗体酶治疗心脑血管疾病的药物开发?　　项目简介：本课题为“九五”和“十五”国家高新技术（863）两度资助课题，目前又获得滚动资助。该成果已获得国家发明专利。本课题内容是利用生物工程抗体酶技术模拟生物体有重要药用价值的抗氧化酶-含硒谷胱甘肽过氧化物酶。经过近10年的研究，获得了活力高于天然酶的含硒抗体酶和系列硒酶模拟物如硒（碲）化环糊精和活性含硒肽，并制备了相应的单链抗体酶。活力均大大优于目前国际上已商品化的Ebselen(0.99酶活单位). ?????? 药学研究方面：明确了治疗心脑血管疾病的疗效。完成含硒人工酶对大鼠心肌缺血/再灌注损伤和异丙基肾上腺素（ISP）诱导大鼠心肌损伤动物实验，以及对卒中易感型自发性高血压脑卒中治疗作用的研究。实验证明含硒人工酶治疗心肌损伤作用明显，对脑卒中具有一定疗效。目前正在开展临床前的药代和毒理研究工作. 含硒抗体酶清除羟自由基作用的ESR研究 化学模拟生物固氮同样是模拟固氮酶的金属辅基 硒是人体必需的微量元素之一。在生物体内,它主要通过构成含硒酶来发挥作用。随着对谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathioneperoxidase,GPX)研究的深入,研究人员发现硒是GPX 催化反应的必要组分,且以硒代半胱氨酸(selenocysteine, Sec)的形式作为酶的催化基团发挥作用。Sec 是由终止密码子UGA 编码,以共翻译的形式插入到新生肽链中。因此,Sec 又被称为第21 种氨基酸。在Escherichia coli 中,Sec 的表达效率只有正常氨基酸的1-3%,因此硒蛋白的体内表达量非常低。而且,Sec 插入依赖的原核生物硒代半胱氨酸插入序列(Selenocysteine InsertionSequence, SECIS)具有种属特异性,因而表达的异源硒蛋白需要引入大肠杆菌的SECIS 元件。在本文工作中,我们探讨了真核硒蛋白在大肠杆菌中的表达。酶催化的本质是底物结合和分子内催化。谷胱甘肽分子是谷胱甘肽转硫酶(Glutathione S-transferases,GST)和谷胱甘肽过氧化物酶的共同底物,但是两者活性部位的催化残基不同,因而催化的化学反应也不同。 罗贵民 男，1943年2月，辽宁抚顺人。大学学历。中共党员。教授。1966年7月毕业于吉林大学化学系，同年留校工作，从事吉林高等院校教育和科研工作30余年。主讲《酶工程原理》硕士生学位课多年。先后过错成国家攻关项目、国家自然科学基金项目《固氮酶结构舆功能及其防氧保证机制研究》、《酶稳定剂的开发研究》、《提高超氧化物岐化酶活力和稳定性的研究》、《含硒人工酶研究》等项目的研究工作。其成果获2项国家教委科技进步3等奖。最近又承担国家863计划项目和国家“九五”攻关项目。他根据酶学原理运用免疫学和化学知识，提高一中制备抗体酶，提到了国际学术界的承认。在国内外核心期刊上发表论文50余篇，有的论文获《生物化学杂志》郑集基金奖、吉林省科委、长春市科委颁发的1等优秀论文奖。获国家专利1项。主要论著有：《蛋白质分子基础》（第2版，高等教育出版社，1995年）、《蛋白质结构基础》（吉林大学出版社，1990年）。从1993年10月起享受国务院颁发的政府特殊津贴。1996年被录入《Who‘sWhointheWorld》（世界名人）第14版中，1998年荣获“长春市有突出贡献市级专家”称号。他曾作为访问学者3次赴美国哥伦比亚大学和志加利福尼亚大学执行科研项目协作研究计划。崇尚的教育格言是吉林大学校训：求实、创新、励志、固强。 　固氮酶是一种能够将分子氮还原成氨的酶。固氮酶是由两种蛋白质组成的：一种含有铁，叫做铁蛋白，另一种含铁和钼，称为钼铁蛋白。只有钼铁蛋白和铁蛋白同时存在，固氮酶才具有固氮的作用(因为这两种物质作为电子载体能够起到传递电子的作用）。 * 硒的作用： 硒被科学家称之为人体微量元素中的“抗癌之王” 科学界研究发现，血硒水平的高低与癌的发生息息相关。大量的调查资料说明，一个地区食物和土壤中硒含