基因工程(选修)…要点.ppt

1、概念： 又叫 或 。 就是 ，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里， 地改造生物的遗传性状。 基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶I的识别序列和切点是--G↓GATCC--;，限制酶II的识别序列和切点是--↓GATC--。根据图示判断下列操作正确的是：? A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割 3.下列关于基因治疗的说法正确的是(　　) A.基因治疗只能治疗一些遗传病 B.基因治疗的主要方法是让患者口服一些健康的外源基因 C.基因治疗的主要原理是引入健康基因修复患者的基因缺陷 D.基因治疗在发达国家已成为一种常用的临床治疗手段 4．关于蛋白质工程的说法，错误的(??? )? ? A．蛋白质工程能定向地改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要 B．蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子的结构 C．蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子? D．蛋白质工程与基因工程密不可分，又称为第二代基因工程 5．下列关于基因工程的叙述中，正确的是（? ） ①该技术将导致定向变异,打破了物种与物种之间的界限? ② DNA探针可用于病毒性肝炎的诊断、遗传性疾病的诊断、改造变异的基因、检测饮用水病毒含量? ③蛋白质中的氨基酸序列可为合成目的基因提供资料? ④受精卵是理想的受体细胞 A ①②③④????B ①③④????C ②③④??? D ①②④ 7. 用基因工程培育抗虫棉的示意图。（1）科学家在进行图中①操作时，要用 分别切割运载体和目的基因，两者的黏性末端就可通过 而结合，再用 连接，Ⅱ的名称是 。（2）基因工程的理论基础是 法则，可用公式（图解）表示为 。 （3）Ⅲ是导入目的基因的受体细胞，经培养、筛选获得一株有抗虫特性的转基因植株。经分析，该植株细胞中含有一个携带目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，在该转基因自交产生F1代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的 。将上述抗虫棉植株的后代种子种植下去后，后代往往有很多植株不再具有抗虫特性，原因是 。要想获得纯合子，常采用的方法是 。 * 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，克服远缘杂交不亲和障碍。 一、基因工程 原 理： 操作水平： 优点： 基因拼接技术 DNA重组技术 按照人们的意愿 (一般为不同种生物间) 定向 操作环境： 生物体外 目的基因 载体 DNA片段 目的基因 磷酸二酯键 识别 切割 黏性末端 平末端 黏性末端 宿主细胞 限制酶 切割 标记 基因 项目种　???? 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 DNA水解酶 几种DNA酶的比较 DNA解旋酶 DNA分子 磷酸二酯键 形成黏性末端或平末端 DNA分子片段 磷酸二酯键 形成重组DNA分子 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 形成新的DNA分子 DNA分子 磷酸二酯键 形成脱氧核苷酸 DNA分子 碱基对间的氢键 形成单链DNA分子 二、基因操作的基本步骤 1、获取目的基因 2、构建基因表达载体 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因检测与鉴定 基因文库 PCR技术 化学方法 基因表达载体 启动子 终止子 标记 同种限制酶 黏性末端 两 DNA连接 重组DNA(环状重组质粒) 一 逆转录法等 基因工程中最为关键的步骤 利用PCR技术扩增目的基因 PCR（多聚酶链式反应）, 利用DNA双链复制的原理,在生物体外大量复制特定的DNA片断 有一段已知目的基因的核苷酸序列 过程: 1、目的基因受热变性后解链为单链（90-95℃ 变性） 2、引物与单链相应互补序列结合（ 55-60℃ 复性） 3、在Taq酶作用下延伸，形成DNA（ 70-75℃ 延伸） 结果：目的基因的量成指数形式扩增（2n) 条件：引物、四种脱氧核苷酸、 DNA母链、Taq酶、能量 PCR技术 DNA复制 ? PCR技术与DNA复制的比较。 DNA双链复制(碱基互补配对) 四种游离的脱氧核苷酸 模板、能量、酶、原料、引物等 ? 解旋 DNA在高温下变性解旋 解旋酶催化 条件 原料 原理 体外