第六节药物的抗病毒实验-安徽医科大学…要点.ppt

第六节 药物的抗病毒实验 一、目的和要求 1.掌握药物体外抗病毒的实验方法和操作步骤。 2.熟悉病毒感染性动物模型的建立和评价。 二、内容 （一）原理 病毒是一类结构简单、非细胞形态的专性细胞内寄生的微生物，必须在易感的活的动物、鸡胚或细胞内才能进行复制增殖。因此可用动物、鸡胚或细胞来进行病毒培养和药物的抗病毒试验。可通过观察细胞培养液酸碱度的变化、病毒致细胞病变效应（CPE）、病毒滴度（PFU）改变、病毒基因组mRNA水平变化、鸡胚尿囊液或动物血清等相应指标的改变，来判断药物的抗病毒试验效果。 （二）材料 1. 9~10 d日龄鸡胚，壳白净且厚薄均匀的鸡卵（莱亨鸡的受精卵由于卵壳薄，在孵育过程中便于检查，为首选） 2. Hep-2细胞或MDCK细胞 3.病毒：如IFV（FM1株）、RSV（Long株） 4.药物：试验药物，阳性对照药 5.动物：小鼠等 （三）操作方法 鸡胚培养为常用的病毒培养法之一，目前主要用于痘类病毒、粘病毒、疱疹病毒的分离、鉴定、制备抗原和疫苗的生产等。 1.接种方法 病毒的鸡胚培养法主要有四种接种途径，即尿囊腔、绒毛尿囊膜、羊膜腔和卵黄囊，不同的病毒应选择各自适宜的接种途径，并根据接种途径确定鸡胚的孵育日龄（见表）。下面将以流感病毒为例进行说明。 表6-1????鸡胚孵育日龄及接种途径选择 2. IFV-FM1的50%鸡胚感染量（EID