人教版生物选修一课题2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》word学案.docVIP

专题2微生物的培养与应用 课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（两课时） 【课题目的】 ①从土壤中分离出能够分解尿素的细菌 ②统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌 【预习导航】 第一课时-----研究思路 （一）筛选菌株 1.农田中使用尿素，植物是如何利用的？ 2.根据科学家从热泉中把耐热细菌筛选出来的研究思路，实验室中进行微生物的筛选原理是什么？ 3.参看本课题使用的培养基配方，说明什么是选择培养基？如何筛选分解尿素的菌株？ （二）统计菌落数目 1.统计样品中活菌数目的方法是 ，说说它的原理是什么？ 2.为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。除此之外， 也是测定微生物数量的常用方法。 3.分析比较统计的菌落数和活菌的实际数目差异的原因 4.在统计菌落数目时，应注意什么事项 （三）设置对照 1.为了提高实验结果的可信度应设置对照，如何排除非测试因素对实验的影响？参看课本举例说明 【当堂练习】 1.土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种A．尿素酶 B．脲酶C．蛋白酶 D．肽酶 2．在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于A．选择培养基 B．固体培养基C．液体培养基 D．半固体培养基 用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基 测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是(　　) A．细菌个体小，真菌个体大B．细菌易稀释，真菌不易稀释 C．细菌在土壤中数量比真菌多D．随机的，没有原因 在寻找目的菌株时，要根据它对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找，下列不属于厌氧细菌生存环境的是(　　) A．土壤深层 B．人或动物体内寄生 C．真空 D．池塘淤泥 ．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是①加尿素②不加尿素③加琼脂④不加琼脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸盐⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦ 公式：观察到的红细胞平均数∶观察到的细菌平均数＝红细胞含量∶细菌含量 缺点 1）不能区分死菌与活菌；2）不适于对运动细菌的计数；3）需要相对高的细菌浓度；4）个体小的细菌在显微镜下难以观察间接计数法（活菌计数法） 2.稀释涂布平板法----从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数 原理：在稀释度足够高时，微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的，即一个菌落代表原先的一个单细胞。 每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。 3．选择培养基 选择培养基的含义是：在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。在培养基中加入某种化学物质可以做到这一点，如加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在培养的培养成分的基础上加入的。 培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时，也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微生物的目的。改变微生物的培养条件， 也可以达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。 4．如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数？ 统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后按课本旁栏的公式进行计算。 【预习导航】第二课时-----实验设计 1.实验设计包括哪些内容？ 2.请你根据实验流程示意图、资料、思考相关问题等写出分离分解尿素的细菌的实验方案 3.取土样应注意哪些事项 4. 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度？测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量，选用的稀释范围相同吗？ 5.写出统计菌落数目以及作为记录结果应注意的事项 6.比较不同种类的微生物需要的培养条件 7. 请根据自己设计的实验方案进行操作，在操作中，应特别注意哪些问题 8.如何分析培养基中是否混有杂菌以及培养基是否筛选出分解尿素的细菌？ 9.写出借助生物化学的方法对分解尿素的细菌进行鉴定的原理及结果。尝试说出其它的鉴定方法。 【当堂练习】