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第3节 遗传密码子的破译 问题探讨 研究的背景: 遗传密码的试拼与阅读方式的探索 遗传密码的试拼与阅读方式的探索 遗传密码的试拼与阅读方式的探索 遗传密码子的验证(克里克的实验) 遗传密码对应规则的发现 遗传密码对应规则的发现 遗传密码对应规则的发现 对比克里克和尼伦伯格的实验 小结 小结 练习 练习 * * * * * * * * * * 我们知道了核酸中的碱基序列就是遗传信息,翻译实际上就是将mRNA中的碱基序列翻译为蛋白质的氨基酸序列,那么碱基序列与氨基酸序列是如何对应的呢? 更多资源 “中心法则”提出后更为明确地指出了遗传信息传递的方向,总体上来说是从DNA→RNA→蛋白质。那DNA和蛋白质之间究竟是什么关系?或者说DNA是如何决定蛋白质?这个有趣而深奥的问题在五十年代末就开始引起了一批研究者的极大兴趣。 1954年科普作家伽莫夫G.Gamor对破译密码首先提出了挑战。当年,他在《自然Nature》杂志首次发表了遗传密码的理论研究的文章,指出三个碱基编码一个氨基酸。 接下来,人们不禁又要问在三联体中的每个碱基作为信息只读一次还是重复阅读呢?以重叠和非重叠方式阅读DNA序列会有什么不同呢? 思考: 当图中DNA的第三个碱基(T)发生改变时,如果密码是非重叠的,这一改变将影响______个氨基酸,如果是重叠的又将影响________个氨基酸。 1 3 在图中DNA的第三个碱基(T)后插入一个碱基A,如果密码是非重叠的,这一改变将影响_____个氨基酸,如果密码是重叠的,又将影响______个氨基酸。 3 3 1961年,克里克对T4噬菌体DNA上的一个基因进行处理,使DNA增加或减少碱基。 通过这样的方法他们发现加入或减少1个和2个碱基都会引起噬菌体突变,无法产生正常功能的蛋白质,而加入或减少3个碱基时却可以合成正常功能的蛋白质。 为什么会这样呢? 这只能解释为:遗传密码中3个碱基编码1个氨基酸。 请比较分析下图:插入___个碱基对原有氨基酸序列影响最小. GGTTCGCACGCTTTGAGC 插一个碱基 GGTATCGCACGCTTTGAGC 插二个碱基 GGTAATCGCACGCTTTGAGC 插三个碱基 GGTAAATCG CACGCTTTG AGC 3 进一步分析上图: 减少___个碱基对原有氨基酸序列影响最小。 3 克里克是第一个用实验证明遗传密码中3个碱基编码1个氨基酸的科学家。这个实验还同时表明:遗传密码从一个固定的起点开始,以非重叠的方式阅读,编码之间没有分隔符。 1961-1962年,尼伦伯格(M.W.Nirenberg,1927~)和马太(H.Matthaei) 的实验 : 这一结果不仅证实了无细胞系统的成功,同时还表明UUU是苯丙氨酸的密码子。 这是第一个遗传密码子被破译。尼伦伯格的实验巧妙之处在于利用无细胞系统进行体外合成蛋白质,他这富有创新的实验方法为他带来了重大的成功! 在接下来的六七年里,科学家沿着体外合成蛋白质的思路,不断地改进实验方法,破译出了全部的密码子,并编制出了密码子表。这项工作成为生物学史上的一个伟大的里程碑!为人类探索和提示生命的本质的研究向前迈进一大步,为后面分子遗传生物学的发展有着重要的推动作用。 需要首先了解细胞中蛋白质合成所需的条件。 证据相对间接,工作量较大。 不足 快速,直接 不需要理解蛋白质合成过程,就能作出推断密码子的总体特征。 优势 多核苷酸磷酸化酶的发现,为得到poly U提供条件 找到使DNA脱落或插入单个碱基的方法——原黄素处理 前提 建立体外蛋白质合成系统,直接破解遗传密码规则。 通过研究碱基的改变对蛋白质合成的影响推断遗传密码的性质。 主要 思路 尼伦伯格体外蛋白质合成实验 克里克的T4噬菌体实验 1954年科普作家伽莫夫用数学的方法推断3个碱基编码一个氨基酸。 1961年克里克第一个用T4噬菌体实验证明了遗传密码中3个碱基编码一个氨基酸。 1961年尼伦伯格和马太利用无细胞系统进行体外合成破译了第一个遗传密码。 1969年科学家们破译了全部的密码。 我们注意整个破译过程中科学家思维的变化,伽莫夫通过数学的排列组合的计算来推测密码子是由三个碱基组成的,克里克则是巧妙地设计实验,使DNA增加或减少碱基的方法从实验上证明了伽莫夫的三联体密码子的推测,由理论走向实验,为密码子的破译迈出重要的一步。而尼伦伯格的实验则更富有创新性,他建立巧妙的无细胞系统进行体外蛋白质合成,成功地破译了第一个密码子,随后的方法不断创新最终破译了
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