2013版高中生物全程复习方略配套(中图版)选修1.6蛋白质和DNA技术资料分析.pptVIP

2.(2012·惠山模拟)某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下： 请回答下列有关问题： (1)样品处理中红细胞的洗涤要用____反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH=7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是____。 (2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是____，若要尽快达到理想的透析效果，可以____ (写出一种方法)。 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的____等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。 (4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有____种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是____。 【解析】(1)洗涤红细胞所用的溶液是生理盐水，根据渗透作用原理，将红细胞置于低渗溶液中，红细胞会吸水涨破，释放出血红蛋白。(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是除去样品中的小分子杂质；可通过增加缓冲液的量或及时更换缓冲液等方法缩短透析时间，能尽快达到理想的透析效果。(3)由于各种分子带电性质以及分子大小、形状等的差异，在电泳过程中产生了不同的迁移速度，实现各种分子的分离。(4)根据图示可知，镰刀型细胞贫血症的携带者含有两种血红蛋白，原因是携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，分别控制合成两种不同的蛋白质。 答案：(1)生理盐水 渗透原理(当外界溶液浓度低于动物细胞内液浓度时，细胞吸水涨破) (2)除去小分子杂质 增加缓冲液的量或及时更换缓冲液 (3)带电性质以及分子大小、形状 (4)2 携带者具有(控制血红蛋白的)一对等位基因，可以控制合成两种不同的蛋白质 3.聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用的问题。 (1)DNA的两条链是反向平行的，通常将____的末端称为5′端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的____开始延伸DNA链。 (2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到____，它的发现和应用解决了以上问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来，所用的培养基叫____。 (3)PCR的每次循环可以分为____三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循环后，反应物中大约有____个这样的DNA片段。 (4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。 (5)简述PCR技术的主要应用。 第六章 蛋白质和DNA技术 血清蛋白的提取和分离 1.方法及原理 (1)方法：电泳法。 (2)原理：①各种蛋白质分子带电性质的差异； ②分子本身大小、形状的不同。 2.实验操作程序 (1)点样：用微量加样器取新制血清，小心加到电泳样品槽的胶面上。 (2)电泳：打开并调节稳压稳流电泳仪进行电泳。 (3)染色：用质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液对凝胶进行染色。 (4)脱色：用体积分数为7%的醋酸溶液脱色。 (5)制干胶板：保存液浸泡凝胶板后，放在两层透气玻璃纸中间自然干燥。 【高考警示钟】 1.电泳时，带电的颗粒向与其电性相反的电极方向移动。 2.电泳时，蛋白质所带的电荷数越多，移动得越快；电荷数相同时，分子量越小，则移动越快。 DNA片段的扩增 1.细胞内DNA复制与PCR技术的比较 温度 相同点 引物 酶 解旋 不同点 PCR 细胞内DNA复制 在解旋酶作用下边解旋边复制 95 ℃高温解旋，双链完全分开 DNA解旋酶、DNA聚合酶 耐高温的DNA聚合酶 RNA 人工合成的DNA单链 体内温和条件 高温 ①需提供DNA复制的模板； ②四种脱氧核糖核苷酸作原料； ③子链延伸的方向都是从5′端到3′端 2.PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 (1)95 ℃变性，双链DNA解旋为单链； (2)55 ℃复性，引物与两条单链DNA结合； (3)72 ℃延伸，耐高温的DNA聚合酶有最大活性，使DNA新链由5′端向3′端延伸。 【高考警示钟】 PCR技术的一个循环包括高温变性、低温复性和中温延伸三个步骤；每一循环中DNA聚合酶只能特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数增长。 血清蛋白的提取和分离 【典例训练1】我们通常选用猪、牛、羊等动物的血液进行实验，来提取和分离血清蛋白。请回答下列有关问题： (1)实验前取新鲜血液，静置凝固后会析出淡黄色的液体——血清，其中含有的蛋白质有____、_