实验-毛细血管采血,WBC计数要点.ppt

临床检验学实验课 临床检验学教研室 实验二 毛细血管采血（Collection of capillary blood) 白细胞计数(White blood cell) 实验二 [要求] 1、掌握毛细血管采血的方法,了解不同 部位采血对检验结果的影响； 2、掌握显微镜WBC计数的原理和方法； 3、熟悉WBC增高和减少的临床意义。 原 理 采血针刺破毛细血管后血液自然流出，用微量吸管吸取一定量的血液。 器 材 与 试 剂 [器材] 一次性消毒采血针、一次性微量吸管、小试管、75％（V／V）乙醇棉球、无菌干棉球。 [试剂] 白细胞稀释液（2％冰醋酸中加入10g/L结晶紫或亚甲兰3滴） 操作 注 意 事 项 1、采血部位皮肤应完整，无烧伤、冻疮、发绀、水肿或炎症等。除特殊情况外，不要在耳垂采血。半岁以下婴幼儿由于手指小，可自拇指、脚趾或足跟内、外侧缘采血；严重烧伤者可选皮肤完整处采血 2、必须严格按无菌技术操作，防止采血部位感染；做到一人一针一管，避免交叉感染， 注 意 事 项 4、第1滴血混有组织液，应擦去。如血流不畅 切勿用力挤压，以免造成组织液混入，影响结果的准确性。 5、在进行多项检查时，采集血液标本的顺序是PLT→RBC→Hb→WBC计数与分类。 方法学评价 原 理 用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时溶解红细胞。将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。 器 材 、试 剂、标本 [器材] 显微镜、改良Neubauer计数板、试管、吸管、微量吸管等 [试剂] [标本] 操作 计算和报告 计算:WBC= ＝ 注：N为计数的四个大格内的WBC总数 结果报告： WBC=X.X X ×109/L 注意事项 1、充池时，如充液不足、液体外溢、断续充液，或产生气泡、充液后移动盖玻片等，均会使细胞分布不均匀，造成计数结果不准确，应重新充池。一般情况下各大方格间的细胞数相差不超过10％。若相差太大，应重新充池。 2、白细胞数量过多时，可采用加大稀释倍数的方法。如20μl血加入到0.78ml稀释液中或10μl血加入到0.38ml稀释液中；数量过少时，可采用扩大计数域的方法，如计数8个或9个大方格；也可采用减少稀释倍数的方法 注意事项 白细胞稀释液不能破坏有核红细胞，它可使白细胞计数结果偏高，此时应计算白细胞校正值（公式中的有核红细胞是指分类100个白细胞时所遇见的有核红细胞） WBC校正值／L＝ 返回 方法学评价 本次实验顺序 复 习 题 1、在进行毛细血管采血时应注意什么？ 2、WBC计数的计数的区域、计数原则和 计算公式是什么？ 3、WBC增高和减低的临床意义是什么？ 计数区域和原则 * * 一、毛细血管采血 1、 实验准备 3、消毒，待干 2、按摩左手食指或中指 4、针刺（深度2-3mm） 5、拭 血（第一滴血） 7、稀释（擦去吸管外余血、冲洗次2-3次） 返回 6、吸血（20ul） 血循环差，血液容易停滞导致RBC、Hb、Hct结果均比静脉血高 受气温影响较大，特别是冬天，波动较大,结果不够恒定 较痛 与静脉血仍存在着某些差异 缺点 痛感较轻 操作方便 实用于反复采集 操作方便 一次可获较多血样结果稳定 优点 耳垂血 手指血 二、 WBC计数 1、加稀释液0.38ml 2、吸取血液20ul 3、混匀、悬液变为棕褐色 4、充池，静止2-3min 5、计数（四角4个大方格）图示 6、 计算、出报告 N . 4 ×10×20×106