第7章 高效液相色谱.ppt

(六)亲和色谱法（AC）简介 亲和色谱是利用生物大分子和固定相表面存在某种特异性亲和力，进行选择性分离的一种方法。它通常是在载体表面先键合一种具有一般反应性能的所谓间隔臂（如环氧、联氨等）；随后，再连接上配基（酶、抗原或激素等）。这种固载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子相互作用而被保留，没有这种作用的分子不被保留。 （七）分离类型的选择 1．根据相对分子质量选择 分子量低的样品，其挥发性好，适用于气相色谱。液相色谱类型（液一固、液一液、及离子交换色谱）最适合的相对分子质量范围是20O～2000。分子量大于2000样品，则用尺寸排阻法为最佳。 2．根据溶解度选择 弄清样品在水、异辛烷、苯、四氯化碳、异丙醇中的溶解度是很有用的。如果样品可溶于水，属于能离解物质，以采用离子交换色谱为佳；如样品可溶于烃类（如苯或异辛烷），则可采分配色谱。  液相色谱分离类型选择参考表 溶于水——排阻色谱，水为流动相 相对分子质量 ＞2000 不溶于水——排阻色谱，非水流动相