食品生物技术总复习摘要.docVIP

食品生物技术总复习 绪论 概念：食品生物技术 食品生物技术：是现代生物技术在食品领域中的应用，是指以现代生命科学的研究成果为基础，结合现代工程技术手段和其他学科的研究成果，用全新的方法和手段设计新型的食品和食品原料。 食品生物技术的研究内容 蛋白质工程、基因工程、细胞工程、发酵工程、生物技术下游工程、酶工程 基因工程与食品产业 概念：基因工程、限制性内切酶 基因工程：是用人工的方法利用重组DNA技术，在体外通过剪切和拼接方法，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞内进行增殖，并使重组基因在受体内表面，产生出人类需要的基因产物。 限制性内切酶：特异性识别一定的DNA核苷酸序列使磷酸二酯键断开，产生具有3＇-OH基因和5＇-P基因。 基因工程诞生的标志：双抗性菌株的获得。 基因工程诞生起决定性作用的理论发现和技术 三大理论发现：（1）DNA是遗传物质的证实 （2）DNA双螺旋模型的提取 （3）“中心法则”和“操纵子”学说的提取 三大技术发明：（1）核酸限制性内切酶的发现和应用 （2）DNA连接酶的发现和应用 （3）载体的发现及其应用 基因工程的主要操作步骤 （1）获取供体内的目的基因 （2）寻找合适的载体 （3）将目的基因与载体体外重组 （4）导入受体细胞中 （5）筛选和鉴定 （6）含重组体的受体细胞大量培养 （7）获得表达产物 获得目的基因的方法 （1）生物学方法（鸟枪法）：物理法或酶法切割。 （2）物理化学法 ①密度离心法 ②单链酶法 ③分子杂交法 （3）化学合成法：已知目的基因（较短）碱基序列或氨基酸序列，用化学方法合成目的基因。 （4）逆转录法：以RNA指导DNA合成，合成的叫cDNA（互补DNA）。 （5）PCR扩增法：PCR多聚酶链式反应。 高温变性 低温退火 中温延伸（72℃） 理想载体应具备的条件 ①能在宿主细胞可进行独立和稳定的自我复制 ②质量尽量小 ③在DNA序列中有适当的酶切位点 ④具一个或多个选择标记基因 常见载体的种类 ①质粒：双链环状DNA分子，在细菌中独立于染色体之外。 分类： 低拷贝数：1-4份拷贝，严密型。 高拷贝数：10-100份拷贝，松弛型。 一般用修饰的改变质粒。 质粒缺点：可插入的目的基因长度短。 ②噬菌体类质粒：λ噬菌体是中等大小的温和噬菌体。 派生出的载体类型：①只具有一个可供外源DNA插入的克隆位点，叫插入型。 ②具有成对的克隆位点，叫取代型载体。 ③病毒载体：哺乳动物细胞载体系统。 噬菌体的生命周期 生命周期： 溶菌周期 溶源周期 常用的工具酶种类 限制性内切酶 碱性磷酸酯酶 DNA连接酶 S1核酸酶 DNA连接酶 逆转录酶 常用的DNA聚合酶 大肠杆菌DNA聚合酶I T4噬菌体DNA聚合酶 T7噬菌体DNA聚合酶 耐热性DNA聚合酶 重组DNA导入受体细胞的途径（举至少3种） ①直接转化法 ②磷酸钙沉淀法 ③体外包装转染法 ④电转化法 ⑤激光微束穿孔转化法 ⑥基因枪转化法 ⑦脂质体介导转化法 ⑧体内注射转化法 重组子的筛选 ①根据载体表型特征筛选重组子 ②根据插入序列的表型特征筛选重组子 ③根据报告基因筛选重组子 重组子的鉴定 ⑴根据重组子DNA分子特性鉴定重组子 ①重组DNA大小（凝胶电泳分离） ②重组DNA分子限制性内切酶酶切图谱 ③PCR扩增片段 ④DNA杂交法 ⑵根据目的基因（mRNA）转录产物鉴定重组子 ⑶根据目的基因翻译产物鉴定重组子 细胞工程与食品产业 概念：细胞工程、细胞全能性、细胞融合 细胞工程：也称细胞技术，是生物技术的主要内容之一。细胞工程是以细胞为基本单位，在离体条件进行培养或人为的精细操作，使细胞在体外大规模地繁殖，使细胞的一些生物学特性按人们的意愿发生改变，从而达到体外生产生物产品的目的。 细胞全能性：一个与合子具有相同遗传内容的体细胞具有产生完整生物个体的潜在能力成为细胞的全能性。 细胞融合：两个或多个细胞相互接触后，其细胞膜发生分子重排，导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程成为细胞融合。 生命特征属性及如何理解 应激性 新陈代谢 自我复制（遗传、变异） 离体培养细胞如何展现该物种的生命特征 已分化的植物细胞在合适的条件下具有潜在的发育成完整植株或个体的能力。 细胞工程的基本操作技术 无菌操作技术 细胞培养技术 细胞融合技术 植物细胞培养类型，按培养