1.2__基因工程的基本操作程序__人教版选修3详解.ppt

* 了解 基因工程原理及基本操作程序 理解 1.获取目的基因的途径及基因表达载体的模式结构 2.目的基因导入受体细胞的方法、检测与鉴定目的基因的方法 1.基因工程基本操作程序的四个步骤 2.从基因文库中获取目的基因　 3.利用PCR技术扩增目的基因 一、目的基因的获取 1．目的基因 主要是编码蛋白质的 ，也可以是一些具有 的因子。 2．目的基因的获取方法 (1)从基因文库中获取目的基因。 ①基因文库： a．含义：将含有某种生物不同基因的许多 ，导入 的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。 结构基因 调控作用 DNA片段 受体菌 所有 部分 核苷酸 功能 染色体 (2)利用PCR技术扩增目的基因。 ①PCR含义：是一项在生物体外 的核酸合成技术，全称是聚合酶链式反应。 ②PCR原理： 。 ③扩增过程： 复制特定DNA片段 DNA双链复制 引物 DNA聚合酶 (3)人工合成法：适于合成基因 ，且 已知的目的基因。 较小 核苷酸序列 二、基因表达载体的构建——基因工程的核心 1．基因表达载体的功能 (1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以 给下一代。 (2)使目的基因能够 和发挥作用。 2．基因表达载体的组成 遗传 表达 目的基因 首端 RNA聚合酶 mRNA 终止子 尾端 目的基因 转录 三、将目的基因导入受体细胞 1．转化 目的基因进入 内，并且在受体细胞内 和 的过程。 2．导入过程 (1)导入植物细胞： 受体细胞 维持稳 定 表达 农杆菌转化法 裸子 单子叶植物 显微注射技术 受精卵 (3)导入微生物细胞： ①方法：用 处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为 )。 ②受体细胞：原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌细胞)。 ③原核生物的特点： 等。 Ca2＋ 感受态细胞 繁殖快，多为单细胞，遗传物质相 较少对 四、目的基因的检测与鉴定 方法 分子水平检测 导入 DNA 分子 检测转基因生物染色体DNA分子上是否插入了目的基因，采用 技术 转录 检测目的基因是否转录出了mRNA，采用 技术 翻译 检测目的基因是否翻译成蛋白质，采用 技术 个体水平鉴定 除了分子检测外，还需要进行个体生物学水平的鉴定，如做 实验等 DNA分子杂交 分子 杂交 抗原— 抗体杂交 抗虫或抗病接种 1．阅读教材P8～10，观察分析图1－6,1－8，探讨下列问题： (1)获取目的基因的方法有哪些？ 提示：有从基因文库中获取，PCR技术扩增和人工合成三种方法。 (2)联系DNA复制，比较PCR技术与DNA复制的不同点(填写下表)。 2．阅读教材P11图1－10左侧内容，观察分析图示，探讨下列问题： (1)基因表达载体由哪些部分组成？具有什么作用？ 提示：①组成：启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因。 ②作用： 启动子：RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出Mrna。 目的基因：编码相关蛋白质，形成基因工程产品或产生新的生物性状。 终止子：使转录过程停止。 标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，便于筛选等。 (2)尝试利用流程图示表示出怎样构建基因表达载体？ 提示：