12基因工程的基本操作程序第二节精要.ppt

归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法、 Ca2+处理 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： * * 步骤一、目的基因的获取 1、从基因文库中获取 2、利用PCR技术扩增 3、人工合成 基因工程的基本操作程序 步骤二、基因表达载体的构建 组成:复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因 它们有什么作用？ 常用的受体细胞： 原核生物：大肠杆菌 枯草杆菌 土壤农杆菌 真核生物：酵母菌和动植物细胞 将目的基因导入受体细胞的原理 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。 步骤三：将目的基因导入受体细胞 转化 目的基因进入_________内，并且在 受体细胞内维持_____和_____的过程 受体细胞 稳定 表达 1、将目的基因导入植物细胞 （1）农杆菌转化法 特点: 农杆菌能感染双子叶植物和祼子植物,对大多数单子叶植物无感染能力 Ti质粒的T—DNA可转移至受体细胞并整合到其染色体上 Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入 植物细胞 整合 植物细胞染色体DNA 表达 新性状 转入 农杆菌 转化过程: （2）基因枪法 基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入