医院感染监测标本采集的标准操作详解.ppt

感染监测标本采集的标准操作 向 霞 制作依据 《医务人员手卫生规范》WS/T313-2009中华人民共和国卫 生部 2009-12-01 实施 《医疗机构消毒技术规范》WS/T367-2012中华人民共和国 卫生部 2012-08-01 实施 《洁净手术部建筑技术规范》修订稿GB50333-2014中华人民共和国国家标准 《医院消毒卫生标准》GB 15982—2012中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 环境卫生学监测的目的 监测消毒效果是否达到标准要求，追寻消毒方法是否正确（消毒设备是否功能完好，消毒剂浓度、质量是否达标），保证医疗环境安全。 规范采集标本的意义 只有标本采集正确，培养结果才可能正确。 才能正确指导消毒隔离措施的落实。 空气净化效果监测频率 2、※放置平皿时，放置顺序是从里往外放，收起的时候是从外往里收，这样避免人员走动引起空气中漂浮粒子震荡引起结果偏高。 对于消毒效果监测，都做静态检测。 一般动态检测只是作为参考，常用于一些课题研究等，因为每个人的动作幅度大小不一，人员数量不一。 如果ICU是洁净环境的，通常动态标准为静态条件下乘以5倍。如果是普通ICU，则是4cfu/15min.直径9cm平皿乘以5倍。 静态：室内设施及功能齐全，空调净化系统正常运行，但无人员的状态 空态：空调净化系统正常运行，没有安装设备，也没有人员 动态：一切系统正常运行、医护人员进行正常手术操作的状态，是我们日常工作的状态 布点顺序：放置培养皿从总平面中最靠里的房间开始布置，依次向外布，最后人员撤出。每间房间也是从房间最靠里的地方开始布置，最后布置门附近的点，然后人员撤出。收取培养皿时顺序相反，从最外边的房间开始收，每个房间从最靠门的培养皿开始收，最先布置的皿最后收，沉降时间略有差别。 物体表面消毒效果监测 使用中的消毒剂及灭菌剂监测 1.采样时间: 采取更换前使用中的消毒剂与无菌器械保存液。 2.采样量及方法: 在无菌条件下，用无菌吸管吸取1ml被检样液，加入9ml稀释液中混均，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂的各种复方消毒剂，需在 肉汤中加入3%吐温80，以中和被检样液的残效作用。 使用中的消毒剂及灭菌剂监测 3.细菌菌落总数检查: 采样管于混旋仪上混匀2分钟，取1ml采样液放入无菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，每份样品同时做2个平行样，一平板置于28℃培养7天，观察霉菌生长情况；另一个平板置于36±1℃培养72小时计数菌落数。 4.结果计算：消毒液染菌量（cfu/ml） 平板上的菌落平均数×10 ×稀释倍数（常为1）。 使用中的消毒剂及灭菌剂监测 5.结果分析:平板上有菌生长,证明被检样液有残存活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理 但不能用于灭菌 ,若每个平板菌落数超过10个,说明每毫升被检样液含菌量已超过100个,即不宜再用。 6.判断标准 6.1使用中灭菌用消毒液：无菌生长 6.2使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml 6.3其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml 压力蒸气灭菌的生物学检测 压力蒸气灭菌：其中生物指标为检查灭菌效果的直接监测指标。通常采用嗜热脂肪芽胞杆菌 ATCC 7953 作为观察灭菌效果的指示菌。 生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌，定期监测（每周一次） 化学指示剂：变色的指示带（每包监测） 压力表定期检测（每半年一次） 安全阀检测、校验（每年一次） 压力蒸气灭菌的生物学检测 培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包的指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果； 结果判定： 阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应进一步鉴定试验组阳性的细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物批示物不需要做阴性对照； 注意事项：监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在有效期内使用。 过氧化氢低温等离子灭菌、环氧乙烷气体灭菌效果的监测 标准指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢 监测方法：将常规生物测试包放在灭菌器最难灭菌的部位（整个装载灭菌包的中心部位）。灭菌周期完成后应立即取出指示菌片接种于含有复方中和剂的0.5%的葡萄糖肉汤培养基管中，36℃±1℃培养7d（自含式生物指示物应遵循产品说明），观察培养基颜色变化，同时设阳性对照；