09 吸光光度.pptVIP

当A＝0.15～1.0，OR T＝70%～10%时， ～ 最小值，此时△T 0.5% 测量的最佳读数范围： 结论： 分光光度法不适用于高含量或低含量的组分 的测定。 对72型分光光度计来说，适宜测定的读数范围： 若不在最佳读数范围之内，可以根据Lambert—Beer定律，适当改变吸收池厚度或待测液的浓度，使A在0.1～0.65范围内。 0.1～0.65 §9.6 吸光光度法的应用 微量组分的测定 高含量组分的测定 多组分的测定 确定化学平衡常数 络合物的组成 光度滴定法 青岛理工大学 * 第九章 吸光光度法 § 9.1 概述 也叫吸光光度法。是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。 分光光度法 优 点 灵敏 准确 快速 选择性好 §9.2 光的吸收基本定律 一、 物质对光的选择性吸收 △E h 1. 吸收的本质： 基态 激发态 2. 物质对光的吸收具有选择性： 当照射光光子的能量（h?）与被照射的物质粒子的基态和激发态能量之差相当时才能被吸收。 不同的物质具有不同的颜色。 3. 吸收曲线： 也叫“吸收光谱”。描述物质对不同波长的光的吸收能力。 选择测定波长的重要依据 A 0.100 0.200 0.300 0.400 400 600 C1 C2 C3 吸收曲线 二、光的吸收基本定律 —— 朗伯－比耳定律 I0 I b 朗伯定律： 比耳定律： 朗伯 －比耳定律： 1760 1852 朗伯－比耳定律的物理意义： 当一束平行单色光通过单一均匀的、非散射性的吸光物质溶液时，溶液的吸光度A与溶液的浓度C和液层厚度b的乘积成正比。 此定律不仅适用于溶液，也适用于其它均匀非散射的吸光物质（gas/solid），是各类吸光光度法定量分析的依据。 A ε bC 摩尔吸光系数的物理意义： 吸光物质在特定波长和溶剂的情况下的一个特征常数。数值上等于1mol.L-1吸光物质在1cm光程中的吸光度，是吸光物质吸光能力的量度。 定量分析的依据: 在多组分体系中，吸光度具有加和性。 在单组分体系中， 三、偏离比耳定律 特别是在溶液浓度较高时，常会出现标准曲线不成直线 如图9-4虚线所示 的现象，称为偏离比耳定律。 在实际工作中 A C 负偏离 正偏离 郎伯定律永远成立！ §9.3 目视比色法和分光光度计 一、 目视比色法 用眼睛观察溶液颜色的深浅来确定溶液中某种物质的含量。 （准确度要求不高的常规分析） 常用方法——“标准系列法” 二、 分光光度计 分光光度法与光电比色法的比较： 光源 滤光片 比色池 光电池 检流计 混合光 单色光 I0 I 光源 单色器 比色池 光电管 检流计 混合光 单色光 I0 I 分光光度法的仪器： 72型 / 721型分光光度计 组成 光源 单色器 吸收池 检测系统 （一）光源 （钨丝灯） ?足够的光强度； ?一定时间内保持稳定。 要求： （二）单色器 组成： 色散元件 狭缝 透镜 棱镜 OR：光栅 单色光 I0 作用： 将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 滤光片的透光曲线 一般滤光片的 “半宽度” ≥30nm 棱镜 纯度较高的单色光： 5~10nm （三）吸收池 I 单色光 I0 比色器 要求：干净 保护其透光面，不要用手触摸 酸洗、浸泡 使用同等型号的比色皿 组成：无色透明、耐腐蚀的玻璃制成。 作用：盛装吸收试液，能透过所需光谱范围内的光。 一般为长方形 液层厚度：0.5、1、2、3cm等 规格 （四）检测系统 要求：产生的光电流应与照射于检测器上的光强度 成正比。 组成： 硒光电池 OR 光电管 检流计 作用：将产生的光强度转变为光电流进行测量。 光电池 光电管 1. 阳极 2.光敏阴极组成的真空（OR少量惰性气体）二极管 §9.4 显色反应及显色条件的选择 一、 显色反应的选择 （1） 灵敏度高 （2） 选择性好: （3） 显色剂在测定波长处无明显吸收。 （4）生成的有色物质组成恒定, 化学性质稳定。 二 显色条件的选择 （1）显色剂的用量: M + R MR 待测组分 显色剂 有色络合物 （2） 溶液的酸度 （3） 显色温度 可通过实验找出各自适宜的温度范围，最好选择室温。 （4） 显色时间 显色时间对显色反应的影响，通常有以下四种情况： （5） 干扰的消除 共存离子如本身有颜色或与显色剂有显色反应。 ?掩蔽剂（络合∕氧化还原）： ?分离干扰离子： ?选择适当的光度测量条件： ?选择适当的显色条件： 三、显色剂 无机显色剂： 生成的有色化合物稳定性不高，灵敏度、 选择性也不高。 有机显色剂： 生成的有色化合物稳定性高，灵敏度、 选择性也高。 三元络合物在光度分析中的应用特性简介： 常用的有机显色剂： 偶