流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在大肠杆菌中的表达.pdfVIP

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2016-05-12 发布于安徽
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流感病毒H3N2血凝素基因和神经氨酸酶基因在大肠杆菌中的表达.pdf

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生物技术通报 BIO TE CHN OLOG Y B ULLETIN 20 11 1 H3N2 1 1 2 2 3 1 1 1 张烨于在江黄捷勤唐启慧陈禹保辛丽陈永坤舒跃龙 1 2 ( , 100052; , 100094; 3, 102206) : 克隆表达和鉴定流感病 H 3N2 HA, NA 基因序列, 为制备抗体和基因工程疫苗打下基础在成功克隆流感病 H 3N 2 全长 HANA 基因并测序的基础上, 将部分基因序列克隆到表达载体 pET32a( + ) 上, 全基因序列克隆到表达载体 pGEX4T1上, 构建了重组表达质粒 pET 32a ( + ) /HA (截短), pET 32a ( + ) /NA (截短), pGEX4T1/HA, 转化大肠杆菌 BL 21/ 2 + R osetta, PTG 诱导表达, 利用 N i 亲和层析柱和 G ST rap 4B 亲和层析柱对重组蛋白进行纯化, 并用 W estern b lo tting 和 EL SA 方法检测其抗原性结果显示, 重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达, SDSPAG E 显示其相对分子质量与预计大小一致 EL SA 和W estern blotting 试验证实, 重组蛋白具有良好的抗原性成功克隆和表达了流感病 H 3N 2 HANA 基因序列, 可为流感病 H 3N 2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供参考 : 流感病 H3N 2 血凝素神经氨酸酶克隆表达 Expression of theHemagglutinin andNeuramidinaseGene of InfluenzaA VirusH3N2 inE . coli 1 1 2 2 3 Zhang Y e Y u Zaijiang Hu ang Jieqin T ang Q ihu i Chen Y ubao 1 1 1 X in L i Ch en Y ongkun Shu Y uelong 1 ( Institute of ViralD isease Control and Prevention, Chinese Centerf orDisease Control andPrevention, 2 3 Beijing 100052; Beijing Biokit Inc.,Beijing 100094; SinoGreen Institutef orB ioEcono y, Beijing 102206) Abstrac:t t was to c l