外显子拼接法克隆紫杉烷2α-羟基化酶基因及生物信息学分析.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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外显子拼接法克隆紫杉烷2α-羟基化酶基因及生物信息学分析.pdf

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生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 4 研究报告年第期 2 - 外显子拼接法克隆紫杉烷 α 羟基化酶基因与生物信息学分析 1，2 1 2 1，2 1，2 1，2 黄仕杰陈平陈晓阳辛燕花郭丽琼林俊芳 1 2 ( ， 510640 ; ， 510640) 华南农业大学食品学院广州华南农业大学生物质能研究所广州 : 2 - ， taxusin 2 ，摘要紫杉烷 α 羟基化酶是形成紫杉醇核心骨架的羟基化反应关键酶之一以作为底物进行氧化生成 α 7 -dihydroxytaxusin 。 DNA ， PCR 2 - DNA ， β 利用蔓地亚红豆杉的总为模板采用技术克隆出紫杉烷 α 羟基化酶的序列利用在线， 2 - cDNA 。比对和生物学软件分析其内含子采用外显子拼接法克隆出紫杉烷 α 羟基化酶基因的序列测序结果表明该基因含 1 1 488 bp ， 495 ; ，有个的开放阅读框编码个氨基酸的多肽同源性比较分析结果表明其碱基序列及氨基酸序列与已经报道的加拿大红豆杉的紫杉烷2 - 98% 89% 。 SWISS-PROT 、DNAMAN α 羟基化酶基因的一致性为分别为和利用等生物信息学工具对，。其列进行了序列分析为利用代谢工程的方法生产紫杉醇或其前体物质提供了分子基础 : 2 - 关键词蔓地亚红豆杉紫杉醇紫杉烷 α 羟基化酶基因克隆生物信息学 Molecular Cloning of Taxoid 2-alpha-hydroxylase Gene from Taxus x media by Exon Spicing and Sequence Analysis Huang Shijie1