东亚三角涡虫DjPreb基因干扰载体的构建及其干扰效果鉴定.pdfVIP

东亚三角涡虫DjPreb基因干扰载体的构建及其干扰效果鉴定.pdf

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生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 9 研究报告 年第 期 东亚三角涡虫DjPreb 基因干扰载体的 构建及干扰效果鉴定 袁佐清 赵博生 ( , 255049) 山东理工大学生命科学学院 淄博 : DjPreb pcDNA3-DjPreb , PCR , 摘 要 以含有东亚三角涡虫 基因的 重组质粒为模板 经 扩增目的片段 将其克隆到干扰 L4440 , L4440-DjPreb HT115 ,IPTG dsRNA 。 载体 上 构建重组质粒 后转化入大肠杆菌 感受态细胞中 诱导表达 后喂食涡虫 显 dsRNA ,Real-time PCR DjPreb 。 微观察喂食 后的涡虫在再生过程中的表型变化 检测载体对涡虫 基因的表达抑制效果 试验结 果显示DjPreb 基因的 RNA 干扰表达载体构建成功,DjPreb 基因 RNA 干扰后涡虫不能正常再生。Real-time PCR 分析饲喂 RNA DjPreb mRNA , DjPreb 。 干扰食物后 的表达显著下降 进一步说明 在涡虫头尾的形成中发挥作用 : DjPreb RNA 关键词 涡虫 干扰 再生 Construction of Interference Vector of Planarian Dugesia j ap onica DjPreb Gene and Preliminary Identification of Its Interference Efficiency Yuan Zuoqing Zhao Bosheng (School of Lif e Sciences ,Shandong University of Technology ,Zibo 255049) Abstract : cDNA fragment for the DjPreb from adult planarians Dugesia j ap onica cDNA library was amplified from recombinant plasmid pcDNA3-DjPreb using PCR and then cloned into the interference vector L4440 .

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