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生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期
2012 2
大豆血红蛋白基因 lba 转化根瘤菌工程菌株的构建
于海鹏1,2,3 潘钰1,2 蒙明明1,2 李海英1,2
1 2
（黑龙江大学生命科学学院 黑龙江省普通高等学校分子生物学重点实验室，哈尔滨 150080 ；黑龙江大学 农业微生物技术教育部
3
工程研究中心，哈尔滨 150500 ； 中国农业科学院农业信息研究所，北京 100081）
摘 要 : 以土著大豆根瘤菌接种大豆幼苗 45 d 后获得的根瘤为材料，提取其总 RNA 并反转录成 cDNA ，采用同源序列克
隆法扩增大豆血红蛋白基因 lba 编码区序列。利用 DNA 重组技术，将 lba 基因连到 lac 启动子的下游，利用带有发光酶标记基
- - - -
因 luxAB 的质粒载体 pTR102 构建表达载体 pTR Plac lba 。采用三亲本杂交的方式，将表达载体 pTR Plac lba 及作为对照的空载体
- -lba ）和SFH （pTR102 ）。盆栽试验发现，接种 SFH （pTR-
pTR102 分别转化土著大豆根瘤菌，获得根瘤菌工程菌株 SFH （pTR Plac
Plac-lba ）的大豆植株各生理指标明显高于接种SFH （pTR102 ）、土著根瘤菌以及未接菌的大豆植株各生理指标。试验证明，导入大
- -lba ）对于提高大豆根瘤的固氮酶活性，增加大豆产量起到显著效果。
豆血红蛋白基因 lba 的根瘤菌工程菌株 SFH （pTR Plac
关键词 : 土著大豆根瘤菌 大豆血红蛋白基因 lba DNA 重组技术 工程菌株 三亲本杂交
Construction of Genetic Engineering Strain of Introduction Glycine
max Leghemoglobin Gene of lba into Native Rhizobium japonicum
Yu Haipeng1,2,3 Pan Yu1,2 Meng Mingming1,2 Li Haiying1,2
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