一种乌鳢及斑鳢线粒体PCR-RFLP鉴定方法.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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一种乌鳢及斑鳢线粒体PCR-RFLP鉴定方法.pdf

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生物技术通报 ·技术与方法· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第期 2014 8 一种乌鳢与斑鳢线粒体 PCR-RFLP 鉴定方法 1，2 1 3 1，2 1 1 董传举张松皓陈坤慈宋迎楠徐鹏孙效文（1. 中国水产科学研究院生物技术研究中心，北京 100141 ；2. 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306 ； 3. 中国水产科学院珠江水产研究所，广州 510380）摘要：为了高效的鉴别乌鳢与斑鳢，采用PCR-RFLP 技术，对乌鳢与斑鳢开展分子生物学鉴定方法研究。通过比对乌鳢和斑鳢线粒体全序列，发现 1 处单核苷酸多态性位点，可以明确区分两个物种。利用1 对引物对乌鳢与斑鳢线粒体基因组该区域进行PCR 扩增，用限制性内切酶 R I 分别对扩增产物进行酶切，并用1.5％的琼脂糖凝胶检测酶切结果。PCR-RFLP 检测结果显示， Eco 斑鳢的PCR 扩增产物被 R I 酶切后生成两个不同大小的片段，分别为315 bp 和875 bp，乌鳢则保持不变。由此可将乌鳢与斑鳢 Eco 在酶切图谱上鉴别出来。关键词：乌鳢斑鳢线粒体基因组 PCR-RFLP 鉴定 - A PCR RFLP Method for Channa argus and Channa maculate Discrimination 1，2 1 3 1，2 1 1 Dong Chuanju Zhang Songhao Chen Kunci Song Yingnan Xu Peng Sun Xiaowen （1. The Centre for Applied Aquatic Genomics ，Chinese Academy of Fishery Sciences ，Beijing 100141 ；2. College of Life Science and Technology ，Shanghai Ocean University ，Shanghai 201306 ；3. Pearl River Fisheries Research Institute ，Chinese Academy of Fishery Sciences ，Guangzhou 510380 ） Abstract: In order to identificate Channa argus and C. maculate efficiently. We developed a PCR-RFLP method to conduct research in molecular biology. Briefly, two genomes of C. argus and C. maculate were aligned and compared, a SNP was identified which can discriminate two Channa species. A pair of primers was designed to amplify the mitochondrial