高温和红光诱导的鱼腥藻7120短藻丝体中TNF-α基因表达效率的提高.pdfVIP

高温和红光诱导的鱼腥藻7120短藻丝体中TNF-α基因表达效率的提高.pdf

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高温和红光诱导的鱼腥藻7120短藻丝体中TNF-α基因表达效率的提高.pdf

( ) 武汉植物学研究 2003, 2 1 4 : 30 1~ 307 J ou rn a l of W uh an B otan ica l R esea rch 高温和红光诱导的鱼腥藻 7120 短藻丝体中 - 基因表达效率的提高 TNF 1, 2, 3 1 4 2 4 3 欧阳叶新 , 施定基 , 钟 晖 , 梁承邺 , 李振甲 , 胡鸿钧 ( 1. 中国科学院植物研究所, 北京 100093; 2. 中国科学院华南植物研究所, 广州 5 10650; 3. 中国科学院武汉植物研究所武汉植物园, 武汉 430074; 4. 中国人民解放军总医院, 北京 100853) 摘 要: 目前解决外源基因在蓝藻中低效表达的主要策略是改进供体DN A 元件。这项工作尝试改变受体系统生 ( ) ( 理状态, 研究对外源基因表达效率的影响。以前已经报道用高温 45 ℃ 和红光处理鱼腥藻 7 120 A nabaena sp. 7 120) 可以诱导其形成短藻丝体, 这里报道以此作为受体细胞, 将构建的含重组人肿瘤坏死因子 ( ) 基 PCC TN F 因的穿梭表达载体 通过三亲接合转移法进行转化。红光和高温诱导形成的短藻丝体中, 基因接 p KT TN F TN F 合转移效率为在正常营养藻丝中的 5~ 6 倍, 杂交结果证明 已在受体细胞中复制。 印 Sou th ern p KT TN F W e stern 迹表明 基因已在受体系统中表达, 放射免疫测定结果显示在短藻丝体中的表达效率提高到在正常营养藻 TN F 丝中的4~ 5 倍。这可能为提高外源基因在丝状蓝藻中的表达效率提供了一条新途径。此外, 研究还分析了人 TN F 基因密码子使用偏向性对在鱼腥藻 7 120 中表达效率的影响

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