通过病毒分离、鉴定和基因检测首次发现虎流感.pdfVIP

吉林省畜牧兽医学会2003学术年会论文集 ·研究与综述· 1巫蚕四 通过病毒分离～鉴定和基因检测首次发现虎流感 夏咸柱1，高玉伟1，扈荣良1，王立刚2，刘丹2，邹啸环3，黄耕1，贺文琦1 (1军需大学军事兽医研究所长舂130062；2黑龙江省东北虎林园，哈尔滨，150027；3军需大学中心实验室， 长春130062) 摘要：应用F。．猫肾传代细胞，从高热、拒食和间有神经症状的死亡虎病料中分离获得l株病毒，经形态学、理 化学，生物学和血清学系统鉴定，证明为1株流感病毒。 采用流感病毒核蛋白基因引物，对分离病毒及该虎病 料进行RT—PCR扩增和序列分析，结果从分离病毒和虎病料中均扩增出与理论值大小相符的464bp基因片段，其 序列与A、B、C三型流感病毒相比较，同源性分别为：A型84．9％以上，B型35．o％左右，C型24．8％左右。该结 果说明所分离病毒为A型流感病毒。命名为刖虎恰尔滨(中国)／01／2002。用HA裂解住点区基因引物从分离病 毒中扩增出582bp的片段，氨基酸序列推导结果表明该病毒HA裂解住点区由6个碱性氨基酸组成，符合高致病 力流感病毒的特征。用此分离病毒静脉接种3月龄家猫3只，出现与病虎相似的临床症状，1只耐过，2只死亡。 剖检变化与死虎相似，主要呈现肺炎病变，并可从病料中回收到所接种病毒。另以此分离病毒为HA抗原，进行 虎与猫血清的HI抗体检测，结果康复虎血清比其病初血清、康复猫血清比其接种前血清HI抗体均有4倍以上增 高，表明该病毒具有致病性，是引起该虎与实验猫发病甚至死亡的病原。从大型猫科动物虎中发现流感并从中分 离获得A型流感病毒，在国内外均属首次。 关键词：流感病毒；A型：分离：虎 中国分类号：S858．659文献标识码：A Thefirst of findingtigerInfluenzaby o o ●，’ 1 ．● ■●一 Vnus1SOla，tlOnand gene sDecltscamDlltlcatlOn Xia Xianzhul，GaoYuweil，Hu Rongliangl，WangLigan92，LiuDan2，ZouXiaohuan3，HuangGengl，HeWenqiI Core 1LaboratoryofVirology,3TheLaboratory,VeterinaryInstitute，TheQuartermasterUniversity ofPLA，Changchun Siberia 130062，China；2HeilongjiangPark,Harbin，150027，China Tiger Abstract：Aninfluenzavirus-likevirusisolatewasobtainedfromthe ofa died specimentiger ofhighfever,anorexia．and twitch．Thisvirus wasconfirmedtobeinfluenzaviruscharacterizationofits by and was ofthe nucleicacidofinfluenzavirus serology．Furtheranalysisperformedbyamplificat