红树林来源Streptomyces sp.pdfVIP

株丧失了产生Drimentines 类化合物的能力，证明driB基因在Drimentines 生物 合成中是必须的。 4.进行了 Drimentines 生物合成基因簇的异源表达研究。将可能包含 Drimentines 整个生物合成基因簇的Cos4 经不同程度的修饰改造之后，通过接合 转移导入天蓝色链霉菌（Streptomycescoelicolor）M1152 之中，将接合子用放线 菌Ⅱ号、R2YE 及稀有培养基进行发酵，所得发酵产物进行HPLC 分析，但未检 测到Drimentines 类化合物或其结构类似物的产生，推测有可能是基因未表达， 或基因簇不完整。 5.初步研究了driM基因的体外催化活性。生物信息学分析表明，driM可能 与Drimentines 中二酮哌嗪结构的合成相关。将driM重组表达质粒导入E.coli CodonPlus(DE3)中，在16℃，0.4mM IPTG 诱导条件下，实现了可溶性表达，纯 化后，初步检测了其催化活性。对几种检测的氨基酸催化活力进行比较发现， DriM 具有比较广泛的底物识别能力，在高浓度底物时，DriM 对所测底物都表现 出了催化活力。 以上研究结果为进一步展开Drimentines 生物合成研究，进而采用组合生物 合成及代谢工程策略实现Drimentines 的结构多样化和定向高产奠定了必要的基 础。 关键词：Streptomycessp. OUC6819；Drimentines；基因组文库；生物合成；异源 表达 Study on the biosynthesis of Drimentines from mangrove Study on the biosynthesis of Drimentines from mangrove SSttuuddyy oonn tthhee bbiioossyynntthheessiiss ooff DDrriimmeennttiinneess ffrroomm mmaannggrroovvee conservation derived Streptomyces sp.OUC6819 conservation derived Streptomyces sp.OUC6819 ccoonnsseerrvvaattiioonn ddeerriivveedd SSttrreeppttoommyycceess sspp..OOUUC Abstract Abstract AAbbssttrraacctt Streptomyces sp.OUC6819 was isolated from the mangrove sediment of South China Sea. It produces terpenoid-diketopiperazine hybrid compounds Drimentines, which exhibit antibacterial, antifungal, anticancer, and anthelmintic activities. Due to their unique heterozygosity structure and significant bioactivities, Drimentines have attracted much attention. To reveal the biosynthetic mechanism of Drimentines in Streptomycessp.OUC6819, we have carried out the following studies: 1.The genomic library of Streptomyces sp.OUC6819 was constructed. Total DNA of Streptomycessp.OUC6819 was extracted and partially digested by restriction endonuclease Sau3