大鼠舌的结构特点及和药物吸收关系的形态学的研究.pdfVIP

中文摘要 大鼠舌的结构特点及其与药物吸收关系 的形态学研究 摘 要 目的：随着生物医学和遗传工程技术的发展，蛋白质及 多肽类药物的种类和数量日益增多，临床应用越来越广泛， 相应的制剂学研究也日益受到重视。临床上常用的蛋白质及 多肽类药物，如血管紧张素抑制剂、心房肽激素、脑啡肽、 人生长激素，免疫调节药物如集落刺激因子，代谢性调节药 物如胰岛素等。这些药物大多为内源性物质，药物作用强、 不良反应小、很少引起过敏反应；但是，与传统的小分子药 物相比，此类药物的稳定性差、体内半衰期短、不易透过生 物膜、脂溶性差、口服生物利用度低，特别是此类药物经口 服后，会受到胃肠道酶的破坏，以及肝脏的首过消除作用。 因此，目前多采用传统的皮下、肌内或静脉注射的给药 途径。传统的皮下、肌内或静脉注射给药方法，对于需要终 身使用药物替代治疗的患者来说，将会带来极大的痛苦和不 便。因此，近年来非D服给药方法，如皮肤和直肠、鼻腔、 眼、口腔、气道、阴道等粘膜给药途径，受到越来越多的重 视，并得到广泛的研究。与此同时，相应的制剂学和给药方 式，以及药物的吸收促进剂等探讨，也极大的促进Y非-aN 给药途径的研究与进展。 采用ID腔或舌下含服的给药方式，是目前最为方便和最 易被大多数患者所接受的；特别是舌下含服给药途径，越来 越受到重视。已有许多研究表明，在配合使用吸收促进剂的 中文摘要 情况下，给予胰岛素舌下滴剂，可以明显降低实验大鼠的血 糖。本文旨在通过对大鼠舌粘膜和粘膜下层结构特点的观 察，为多肽类药物跨舌粘膜吸收的途径和能力，提供结构基 础方面的证据。 方法：选用健康成年SD大鼠，雌雄不限，体质量为150～ 2009，随机分成三组，采用腹腔注射2％戊巴比妥钠溶液(30～ 35 mg／kg)麻醉。 一组切取整舌，经OCT包埋后，置于液氮内冷冻，恒冷 切片机连续切片(片厚鼽m)，切片经二甲砷酸缓冲液配制的 序滴加5，-核苷酸酶和碱性磷酸酶反应孵育液，反应后充分清 洗，水性封片剂封片；相邻组织切片均进行HE染色，与酶组 织化学染色切片对照观察。 二组经左心室温生理盐水冲洗后，灌注3％多聚甲醛和1 ％戊二醛混合固定液，行组织内固定后，再切取整舌用于扫 描电镜的样品制备，标本置于2％单宁酸溶液中，做组织导电 处理，经1％锇酸溶液后固定，梯度乙醇脱水、叔丁醇冻结真 空升华干燥、真空离子镀膜仪镀金后，用扫描电镜观察、拍 照。 三组用于透射电镜样品制备，于低温操作台上，切取新 鲜舌，将靠近舌根处的舌腹侧组织，置于3％多聚甲醛和1％戊 2mm×3 二醛混合固定液中，浸泡固定；修成lmmX mm的组 织块，经0．Olmmol／L磷酸盐缓冲液充分清洗，先后置于2％单 宁酸和1％锇酸溶液中，行导电处理和组织后固定各2h，梯度 乙醇脱水，丙酮置换，Epon-812树脂浸透和包埋。部分组织块 做半薄切片，用美蓝染色和光镜观察，确认组织块内，包含有 中文摘要 舌腹侧粘膜和粘膜下层。修切组织块以适于超薄切片，超薄 切片载于200目铜网上，经醋酸铀和枸橼酸铅电子染色后，用 透射电镜观察和摄像。 另外，将已经酶组织化学双重染色的组织切片，用梯度 乙醇脱水，叔丁醇置换，置于烤箱干燥后，应用扫描电镜，进 行二次电子图像(SEI)和背散射电子图像(BED的观察和 慑像。 结果：HE染色切片的光镜观察显示，舌腹侧面可分为粘 膜层、粘膜下层和肌层，各层境界清楚。粘膜层的细胞呈多 层排列，游离面有一层无细胞结构的角质层，越靠近基底层， 细胞数目越多；粘膜下层的结构比较疏松，可见数目众多的 管腔结构，管腔的大小和形状不一。在肌层内，可见横行或 纵形的肌束，其间也可见到管腔性结构，形态同粘膜下管腔 结构相似。舌背侧面可分为粘膜层和肌层；但是，粘膜层表 面可见大量的舌乳头，其结构贯穿粘膜层；缺乏粘膜下层， 但粘膜基底层较厚；肌层特点与舌腹侧的结构相似。 酶双