不同力学条件下大鼠骨折愈合和巨噬细胞和骨形态发生蛋白2的关系.pdfVIP

不同力学条件下大鼠骨折愈合与巨噬细胞和 骨形态发生蛋白2的关系 硕士研究生：李明 指导教师：李靖年教授 指导小组：赵文志副教授 专业名称：外科学 摘 要 目的研究不同力学条件下大鼠骨折愈合与巨噬细胞及骨形态发生蛋白2的 关系。生物骨骼组织具有适应力学环境变化的能力，这种适应能力的分子和细胞 学基础仍不完全清楚。骨骼的雏形由基因决定，但在骨骼再生过程中，力学作用 对其形态学的细微调整起决定性作用。目前，在骨骼愈合过程中，局部力学负荷 诱导软骨内骨化或膜内骨化一直存在争议和猜测。周期性运动和与之相关的剪切 应力有利于软骨骨痂的形成，并通过软骨内骨化达到愈合：适度的张应力，可产 生直接修复或膜内化骨。研究间充质细胞如何感知这些不同的力学环境、如何向 着软骨形成或骨形成道路分化以及它们的分子和细胞学机制，具有重要的意义。 本实验中，我们制造稳定和不稳定胫骨骨折的大鼠模型，用组织学及免疫组化方 法，研究稳定及不稳定骨折愈合过程中巨噬细胞和骨形态发生蛋白2(B枷P．2) 的分布与作用，探讨不同力学条件下骨折愈合的细胞与分子机理。方法60只成 年雄性SD大鼠，平均体重O．41kg，随机分为固定组和非固定组，每组30只，用 质量分数2．5％硫贲妥钠(2m抛g体重)腹腔内注射麻醉，采用三点弯曲方法造成 右胫骨中段闭合性骨折模型。固定组大鼠右胫骨骨折后行髓内钉固定，非固定组 每组分别处死3只大鼠，取材行组织学(HE染色、m舔∞n三色染色)及免疫组 织化学(sABC法)检查和分析(计算机软件图象分析)，测定骨折愈合过程中骨 折断端CD68／BMP．2阳性细胞计数变化和浓度值变化，并取材检测骨折端骨密度 阳性表达，第2天表达下降，第4天表达达到高峰，以后表达下降，第8天固定 组表达消失，第lO天非固定组表达也消失。且固定组cD68计数和浓度值均高于 非固定组，方差分析两组的差异具有显著性(Po．05)。BMp2表达两组第4天均 存在，第8天遮高峰，以后下降，第28哭仍商袭达。其中第4、S、8天固定组BMp2 计数和浓度蠖均离予嚣蠢定缀，方麓分辑嚣缀煞差筹典裔显磬健(po，嬲)，第14、 2l、28天菲围定组BMp2计数和浓度值均高予固定组，方纛分析两组的差舜舆有 显蓑热(P《。，05)。X线片显永两缎骨撰均愈会，霪攒最14夭，《见步}鸯癞轮薅 清渐，呈梭形膨大，稳断端臀痂未连接。骨折后2l夭，外臀痂基零形成桥横。 骨拼嚣28哭。外夤癞完全形成挢接，嚣瘸疆积开始缭小，皮矮骨羹蹩。豢2、3、 4弱的骨密度津函定缀均丈予蕊定缜，其中篇4髑的骨密发缎方差检验两缀舶羞 冥嶷旃显著憔P哟，os)。结论骨攒处力学条髂能影响胞外基质分予的表达鞠巨 噬缀腿的迁入，并浚黛参与臀折愈裔熊缅飘闻的褶疑作用。溺定缮软骨出现举， 结窳快，骨撅愈合快；非固定缀软骨袋成持续时间较长，嚣化延迟，从藤延缓了 曹辑鹊愈合。匿噬缩胞不靛在软缀绒愈合蕊艇在鸯愈合中部是一个蓬要诩豢。 BMP．2在骨掰愈合和嚣改建中起重疆作甩。 BMP2 关键词： 力学条件 骨撕愈合 eD6 大鼠 2 and bOne 2 IⅥacrophages in stabilized morphogenetic protein and nOn—stabilized ltactures he