慢性髓细胞性白血病和血管生成关系的实验的研究.pdfVIP

慢性髓细胞性白血病与血管生成关系的实验研究 中文摘要 血管生成在肿瘤性疾病中是一种关系到肿瘤生长、播散、侵袭和转移的病理 过程。血管生成与实体肿瘤的关系已经得到证实，但其与血液肿瘤的关系虽然有 一些研究，其机理尚未得到完全的了解，尤其对慢性髓细胞性白血病 (CML), 由于是一种干细胞病变，肿瘤细胞存在多样性，分离和纯化比较困难，研究更是 较少。血管生成存在着如VEGF和b-FGF等阳性调节因子，由血管内皮细胞和 基质细胞等分泌，以旁分泌的途径调节血管的发生和生长。同时肿瘤细胞表面存 在着KDR和Flt-1等VEGF受体，以自分泌的途径接受VEGF的刺激，并自身 分泌VEGF和其他细胞因子，保持肿瘤细胞的增殖。两条途径都能导致肿瘤内 和周围环境中微血管密度 (MVD)的明显增高。高表达的VEGF还可能下调抑 癌基因野生型P53并使其出现多种突变。 本实验收集CML患者 16例作为研究组，ITP患者6例和健康人4例作为对 照组。研究组和对照组都收集外周血清，用ELISA方法检测VEGF浓度。研究 组和ITP对照组取骨髓组织活检，用CD34单抗标记检测MVD，同时取外周血 和骨髓细胞，采用RTPCR法检测VEGF,b-FGF,KDR,Flt-1和野生型P53基 因表达。 检测结果，研究组外周血VEGF浓度明显高于对照组，差别有统计学意义。 各种引物骨髓细胞和外周血RT-PCR检测结果基本吻合，没有受到骨髓中其他细 胞的干扰。VEGF和b-FGF基因高表达，两组差别有统计学意义。KDR的表达 不明显，Fit-1明显表达但与对照组没有明显差别。野生型P53高表达，明显高 于对照组。 可以得出结论，CML与血管生成之间存在着明显的关系，血清VEGF浓度 的升高，至少说明了CML的发展是受到旁分泌途径的调节的。而虽然KDR和 Flt-1的表达意义不大，但VEGF和b-FGF基因高表达，证实了肿瘤细胞分泌血 管生成因子增加，自分泌途径是可能存在的。野生型P53高表达，可能提示在 CML患者，野生型P53的表达与VEGF的分泌及血管生成的关系不大或存在着 引物序列之间的突变。 关键词:慢性髓细胞性白血病;血管生成;血管内皮细胞生长因子;微血管密度; Flt-1; TheRelationshipofChronicMyelocyticLeukemia andAngiogenesis Abstract Angiogenesisisapathologicalprocessassociatedwithgrowth, differentiationandmetastasisinneoplasticdisease.Whiletheimportance ofangiogenesishasbeenestablishedinsolidtumor,ithasnotbeenfully elucidatedinhematopoieticmalignanciesalthoughtherearesomestudies havebeen carriedout,especially forthechronicmyelocytic leukemia(CML).Becauseofseveralreason，suchasCMLisalesionof stemcell,thetumorcellshavediversiyt,itismoredifficulttoboth separationandpurification,few investigationhasbeendone.The angiogenesishassomepositiveregulatorssuchasvascularendothelial growthfactor(VEGF)andbasicfibroblastgrowthfactor(b-FGF).They areexcretedbytheendothelialcellandstromacell,andregulatethe formationandgrowthofbloodvesselbyparacrinepathway.Atthesame time,therearesomereceptorsofVEGFsuchasKDRandFlt-1onthe su