生物化学综合实验-合肥工业大学课程_new教程.doc

《生物化学综合实验》 实验指导书 适用专业：生物技术、生物工程、食品科学与工程 生物与食品工程学院生物科学系 实 验 基 本 情 况 一、实验题目 1. 核酸的分离纯化及性质研究 2. 蛋白质的分离纯化及性质研究 3. 糖蛋白的分离纯化及性质研究 4. 脂的分离纯化及性质研究 二、选题要求 每小组（2个人组成一个小组）选一个实验题目； 实验中所需生物材料自选，可选用多种生物材料； 实验内容的安排要有一定工作量，必须包括指导书中要求运用的实验技术。 三、学生准备的要求 学生选定实验内容后，要写出实验方案，包括：实验目的和意义；实验方法及操作过程（至少准备两种方案）；各种方法所需仪器（包括设备和玻璃器皿）、药品及其数量。实验方案必须在综合实验前五周完成，并经过指导教师审阅。 四、综合实验的评分标准 学生综合实验成绩由指导教师评定，分为优秀、良好、中等、及格和不及格几类。评定依据是学生的态度、出勤率、实验准备情况、实验动手能力、实验结果、以及实验的创新性上进行评分（具体见附录1）。 五、实验报告要求 综合实验完成后，必须提供一份实验记录和一份实验报告。实验报告形式见附录2。 实验1. 核酸的分离提取及性质研究 实验目的 核酸的分离纯化是核酸制备及分析的前提和基础，通过本实验将学会和掌握核酸制备的一些基本操作和方法，通过分光光度法和电泳等实验技术研究核酸的性质，同时掌握用RFLP技术分析不同材料之间亲缘关系的方法。 实验仪器与试剂 主要仪器：研钵、高速离心机、紫外分光光度计、涡旋仪、水浴锅、微量加样器、电泳仪、紫外透射反射分析仪、PCR仪、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱。 主要试剂：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、巯基乙醇、EDTA、氯仿、异丙醇、HCl、蔗糖、NaCl、苯、PCR试剂盒等。 要求运用的实验技术 紫外分光光度技术、琼脂糖凝胶电泳技术、高速离心技术、限制性内切酶酶解技术、PCR技术等。 参考书目 （仅供参考，另外可以查阅期刊杂志） 1. 生物化学实验，武汉大学出版 2. 生物化学实验，中国科学技术大学出版社 3. 生物化学实验原理和方法，北京大学出版社 实验2. 蛋白质的分离纯化及性质研究 实验目的 蛋白质（包括酶）的性质、结构和功能的研究，以及生物体内物质代谢途径的阐明等都是建立在蛋白质和酶的分离纯化基础上的。在蛋白质的分离过程中，必须通过浓度、纯度和活性的测定来决定分离步骤的取舍。酶促反应动力学，尤其是抑制剂酶促反应动力学是研究酶的结构与功能关系的一个重要方面。本实验通过对蛋白质（或酶）的分离纯化、浓度、纯度和活性的测定、动力学进行研究，从而掌握蛋白质和酶的系列研究方法和操作。 实验仪器与试剂 主要仪器：研钵、纱布、离心机、紫外分光光度计、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱、真空泵、透析、层析柱、自动收集器、漏斗等。 主要试剂：pH试纸、乙酸、硫酸、NaOH、HCl、硼酸、Tris、硫酸铵、胰蛋白酶等 要求运用的实验技术 盐析技术、离心技术、柱层析技术、紫外分光光度技术、聚丙烯酰胺凝胶电泳技术、透析技术等。 参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志） 1.蛋白质技术手册，科学出版社 2. 现代酶学，华东理工大学出版社 3. 蛋白质电泳实验技术，科学出版社 实验3. 糖蛋白的分离纯化及性质研究 实验目的 糖蛋白在功能性食品功效中有着重要作用，研究糖蛋白的性质、功能都是建立在糖蛋白质分离纯化基础上的。在糖蛋白质的分离过程中，必须掌握分级柱层析技术，进一步理解生物化学中有关成分分离提纯的基本理论。本实验通过对糖蛋白质进行分离纯化、相对分子质量测定、简单理化性质测定等，从而掌握和理解糖蛋白研究方法和操作。 实验仪器与试剂 主要仪器：研钵、纱布、离心机、层析柱、微量加样器、水浴锅、可见与紫外分光光度计、试管、烧杯、试剂瓶、冰箱、旋转蒸发仪等。 主要试剂：苯酚、硫酸、双缩脲试剂、Folin-酚试剂、HCl、Tris、NaOH、乙醇、丙酮、乙醚、牛血清、硫酸、葡萄糖、DEAE-52纤维素、SephadexG-100、透析袋等 要求运用的实验技术 柱层析技术、透析技术、离心技术、分光光度技术等。 参考书目（仅供参考，另外可以查阅期刊杂志） 1. 生物化学实验，武汉大学出版 2. 生物化学技术原理及其应用（第二版），武汉大学出版社 3. 生物化学实验方法和技术，科学出版社 实验4. 脂的分离纯化及性质研究 实验目的 研究作为一重要的生物大分子脂的基本性质。脂类物质的研究也是基于分离纯化的基础上的。通过对脂的分离，使学生掌握非极性物质的柱层析技术，进一步理解生物化学中有关成分分离提纯的基本理论。本实验通过对脂类物质进行分离纯化、皂化脂与非皂化脂的分离、脂的简单理化性质测定等，从而掌握和理解脂的研究方法和操作。 实验仪器与试剂 主要仪器