第6章分光光度法教案.ppt

第六章 吸 光 光 度 法 化学分析：常量组分(1%), Er 0.1%～0.2% 依据化学反应, 使用玻璃仪器 6.1 吸光光度法的基本原理 特点 : 灵敏度高：测定下限可达10－5～10－6mol/L, 10-4 %～10-5 % 准确度能够满足微量组分的测定要求： 相对误差2～5％ （精密光度计为1～2％） 操作简便快速 应用广泛 光学光谱区 分子吸收光谱的产生 4. 光吸收基本定律: Lambert-Beer定律 T－透光率（透射比）（Transmittance） K—吸光系数； b—光程，即比色皿厚度；c—浓度 朗伯-比尔定律的适用条件 单色光 应选用?max处或?max肩峰处测定 2. 介质要均匀 当待测液是胶体、乳浊液、悬浮液等不均匀体系时，入射光除被吸收外还有反射、散射损失，从而是吸光度增大导致正误差。 3. 稀溶液（吸光度=0.2-0.8） 浓度增大，分子之间作用增强 6.2 光度分析的方法和仪器6.2.1 光度分析的几种方法 方便、灵敏，准确度差。常用于限界分析。 2. 光电比色法 3. 吸光光度法和分光光度计 分光光度计的主要部件 1、光源：发出所需波长范围内的连续光谱，有足够的光强度,而且稳定。 可见光区：钨灯，碘钨灯(320～2500nm) 紫外区：氢灯，氘灯(180～375nm) 2、单色器：将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。 棱镜:玻璃350～3200nm, 石英185～4000nm 光栅:波长范围宽,色散均匀,分辨性能好, 使用方便 3、吸收池：(比色皿)用于盛待测及参比溶液。 可见光区：光学玻璃池 紫外区： 石英池 4、检测器：利用光电效应，将光能转换成电流讯号。 光电池，光电管，光电倍增管 5、显示系统： 低档仪器：刻度显示 中高档仪器：数字显示，自动扫描记录 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 检测器 光电管 光电倍增管 6.3 显色反应与分析条件的选择 有机显色剂 显色反应的选择 *灵敏度高，一般ε104 *选择性好 *显色剂在测定波长处无明显吸收。 对照性好, ?λmax60 nm . *反应生成的有色化合物组成恒定，稳定。 *显色条件易于控制，重现性好。 6.3.2 显色条件的确定 2. 显色反应酸度（c(M)、 c(R)一定） 6.3.3 干扰及消除 2. 物理法 -- 选择适当的参比溶液 1. 仅络合物有吸收，溶剂作参比。 如 phen—Fe2+ 标准曲线 2.待测液也有吸收，被测液作参比。 如 测汽水中的 Fe 3. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe， 参比溶液为不含Li2CO3样品的所有试剂。 4. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消除时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比. 2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比. pH1pHpH2 pH 3. 显色温度及显色时间 另外，还有介质条件、有机溶剂、表面活性剂等 T1(℃) T2(℃) t(min) A Co2＋, Fe3+ Co2+ FeF63- Co(SCN)2 (蓝) ⑴NaF SCN－ Co2+ Fe2+,Sn4+ (2)Sn2+ Co(SCN)2 SCN－ 测Co2＋(含Fe3+) : (掩蔽法) 1.化学法 Co2+, Zn2+, Ni2+, Fe2+ CoR,ZnR NiR,FeR CoR, Zn2+ , Ni2+ , Fe2+ 钴试剂R H+ 测Co2＋ :(生成络合物性质不同) 如不能通过控制酸度和掩蔽的办法消除干扰，则需采取分离法。 测Fe3＋:(控制pH) Fe3+, Cu2+ FeSS （紫红） Cu2+ pH 2.5 SS —选择适当的测定波长，一般是选择λmax，但在λmax有干扰的情况下应选择其它波长。 515 655 415 500 钍-偶氮砷III 钴-亚硝基红盐 A A 络合物 络合物 试剂 试剂 * 化学分析与仪器分析方法比较 仪器分析：微量组分(1%), Er 1%～5% 依据物理或物理化学性质, 需要特殊的仪器 准确度高 灵敏度高 吸光光度法是基于