牛奶中单增李斯特菌检测方法的研究 毕业论文设计.doc

毕业论文任务书 专业名称 生物工程 论文 题目 牛奶中单增李斯特菌检测方法的研究 题目 来源 自选 目的意义： 在人类社会空前繁荣的今天，食源性疾病已经深重地困扰着人类生活，并在不断地加剧，食品安全问题在21世纪的今天已经成为全世界关注的大问题，并且直接对国家的经济发展和消费者的身体健康产生了重大影响。近年来，国内外有关食品安全的负面新闻不断，社会对食品安全的呼声也越来越高在众多食品安全的热点问题中，牛奶及相关产品与人们的生活息息相关，随着生活水平的提高，人们对牛奶质量的要求越来越高,是一种常见的重要的食源性致病菌。它能引起人、畜的李斯特菌病,感染后主要表现为败血症、脑膜炎和单核细胞增多,特别对孕妇、新生儿、老年人和免疫缺陷病人危害严重。因此，建立简便快捷、灵敏度好、特异性高的单增李斯特菌检测技术成为众多研究者的共同期望并且具有重大现实意义。 根据检测原理,食品中单增李斯特菌的检测方法大致可以分为三类:平板培养法、免疫学方法和分子生物学方法。平板培养法是检测食源性致病菌的最传统的方法。这种方法采用选择性培养基对目标菌进行增菌培养,然后进行生化鉴定,包括增菌、分离和鉴定三个环节。免疫学方法目前已有的检测方法有酶联免疫吸附剂测定( EL ISA ) 、酶联荧光分析法( ELFA) 、同位素标记抗体法(放射免疫)及其它多种方法,如乳胶凝集、免疫传感器、免疫扩散及免疫色谱技术等。分子生物学方法有PCR检测方法DNA探针DNA芯片(DNA microarray)等。这三类检测方法各有利弊,并且仍在不断地改进和完善中。 本实验的目的在于通过模拟单增李斯特菌污染牛奶，通过免疫学方法，结合特征鉴定手段，判定检测的灵敏度，并寻求理想的检测方法。 可行性分析： 随着的不断发展，各种高纯度抗体、抗原和抗体复合物得以制备，为奠定了基础，有利于的建立，并且本试验已经具备了、恒温水浴锅HH-2、HJ-型磁力搅拌器、及其它辅助设备等试验器材，为研究的进行提供了前提。从建立检测牛奶中方法具有了可行性。 3.7 下达任务书； 3.～3.1 查阅资料，准备开题报告； 3.1～3.25 准备试验材料； 3.26～4.10 进行； 4.10～5.1 进行； 5.1～5.2 进行间接ELISA方法对牛奶中试验； 5.2～ 整理数据撰写论文，准备答辩该课题拟对食品中建立检测方法进行研究，选题明确，针对性强，实验条件基本具备，进度安排较为合理。 学 号 指导教师 职 称 所在学部 生命科学学部 论文名称 牛奶中单增李斯特菌检测方法的研究 选题依据： 近年来，国内外有关食品安全的负面新闻不断，社会对食品安全的呼声也越来越高，食品安全问题是关系经济民生的重大问题。在众多食品安全的热点问题中，牛奶及相关产品与人们的生活息息相关，随着生活水平的提高，人们对牛奶质量的要求越来越高。近年来，国内外不断曝光食品安全问题，使牛奶质量问题成为人们关注的焦点。牛奶中主要原因是,成本低,可以给出定性和定量的结果。但检测过程中,制备培养基、计算菌落数量和鉴定菌落的生化特性都耗时耗力,并且培养方法的成功依赖于样本中细菌的数量和状况、培养基的灵敏度、孵化条件和分离培养基的选择性,不适合当前食品快速检测的需求；免疫学方法具有操作简便、快速的特点,但缺点是灵敏度低,特异性较差，容易受到微环境的干扰而导致检测的不精确；分子生物学方法要求条件苛刻，稳定性差，一般只应用于科学研究中。因此，建立一种简便快捷、灵敏度好、特异性高的检测方法是科研者的共同期望。 研究方法、内容： 本试验主要研究的内容如下： 人为制造单增李斯特菌污染牛奶的条件，利用ELISA方法。 。 进度安排： 3.7 接受任务书； 3.3.14 查阅资料，准备开题报告； 3.13.25 准备试验材料； 3.264.10 进行单增李斯特菌的增菌实验； 4.10～5.1 进行单增李斯特菌的鉴定实验； 5.1～5.25 进行间接ELISA方法对牛奶中试验； 5.2 整理数据；撰写论文，准备答辩(Listeria monocytogenes ,LM) 是李斯特氏菌(Listeria) 属中最重要的人类食源性病原菌。该菌广泛存在于自然界如土壤、人和动物的粪便中[1]。该菌很容易污染食品而引起人的食物中毒，食品中单增李斯特菌的污染状况已受到各国政府和食品安全机构的广泛关注。,原材料的污染也是值得注意的问题。为了保障的卫生和安全对问题进行了许多调查和研究并且正在寻求简便、快速、准确和敏感性高的检测方法以满足日趋严格的限量的要求。LM可引起新生儿及婴儿化脓性脑膜炎和成人