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哈尼族药铜锤白花片的质量标准 　　【摘 要】 目的：建立哈尼药铜锤白花片的质量标准。方法：采用薄层色谱法（TLC）定性鉴别三七、独活和白芍，采用高效液相色谱法（HPLC）测定制剂中龙血素b的含量。结果：TLC法能定性检出三七、独活和白芍，斑点清晰，且阴性对照无干扰；HPLC法测定龙血素b，进样量在0.031～0.157μg，龙血素b峰面积与进样量呈现良好的线性关系（R2=0.998），平均回收率98.42%（RSD 0.82%）。结论：所建标准简便可行，稳定性好，可用于哈尼族药铜锤白花片的质量控制。 中国论文网 /6/view-7250793.htm 　　【关键词】 铜锤白花片；薄层色谱法；高效液相色谱法；龙血素b 　　【中图分类号】R284.1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2016）04-0019-02 　　铜锤白花片来源于云南哈尼族民间，主要用于治疗治腰椎间盘突出症、腰椎间盘突出症引起的腰腿疼痛等症状，本方在普洱市民族医院临床使用多年，疗效显著。该方由铜锤草、白花丹、龙血竭和三七等十九味药组成，临床上以汤药使用，为方便患者储存、携带和服用，将其剂型改为片剂。为建立其质量标准，保证临床疗效，采用薄层色谱法鉴别方中的三七、独活和白芍，高效液相色谱法测定方中的有效成分龙血素b，为铜锤白花片的质量控制提供实验依据。 　　1 材料 　　1.1 仪器 Waters 1525 HPLC 仪（美国Waters公司）；KQ250型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AG135十万分之一电子分析天平（瑞士Mettler Toledo公司）；Scanner-3薄层色谱扫描仪（瑞士CAMAG公司）。 　　1.2 试药 铜锤白花片（规格0.5g/片，北京师范大学制备，批20140816；龙血素b（批号111558-201407）；人参皂苷R1（批号110703-200424）；芍药苷（批号110736-201438）；独活对照药材（批号1200940-201111）；均购于中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯；水为纯净水；其他试剂均为分析纯；硅胶板（青岛海洋化工厂分厂）。 　　2 方法与结果 　　2.1 铜锤白花片的制备 将铜锤草、三七、龙血竭、蜈蚣等药材粉碎成细粉，备用，白花丹、独活、牛膝、桂枝、灯盏花、当归、白芍等药材加水煮提三次，第一次加10倍量水浸泡2h，煮沸2h，第二次加8倍量水，煮沸1h，第三次加8倍量水，煮沸1h，合并滤液，浓缩成稠膏状后加入备用细粉搅拌均匀，制粒，整粒，压片，即得。 　　2.2 薄层色谱鉴别[1-3] 　　2.2.1 三七的鉴别 取铜锤白花片5g，研碎，粉末加乙醇50ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加1ml乙醇溶解，作为供试品溶液；再取人参皂苷R1对照品，加甲醇制成1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；按供试品制备方法制得缺少三七样品的阴性液；吸取上述溶液，分别点于同一高效硅胶G薄层板上。分液漏斗中加入三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇和水的混合溶液，比例为7.5∶20∶11∶5，置10 ℃以下放置，取下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，以10%的硫酸乙醇溶液为显色剂，在105℃加热至斑点显色清晰。置紫外光灯（365nm）下检视，铜锤白花片供试品与人参皂苷R1对照品在薄层板相应的位置上，显相同的荧光斑点。见图1。 　　2.2.2 独活的鉴别 取铜锤白花片5g，研碎，粉末加乙酸乙酯50ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加1ml乙酸乙酯溶解，备用；取独活对照药材加甲醇25ml，超声30min，滤过，滤液浓缩至1ml的溶液，作为对照品溶液；按铜锤白花片供试品制备方法制得缺少独活样品的阴性液；吸取上述溶液，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正己烷-甲苯-乙酸乙酯（2∶1∶1）为展开剂，展开，取出，晾干，于紫外光灯（365nm）下检视。铜锤白花片供试品与对照药材在薄层板相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图2。 　　2.2.3 白芍的鉴别 取铜锤白花片5g，研碎，粉末加甲醇5ml，超声30min，滤过，滤液蒸干，残渣加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液；对照品溶液取适量芍药苷，加甲醇制成1ml含1mg芍药苷的溶液；除去白芍样品，按铜锤白花片供试品制备方法制得的阴性液；吸取上述溶液，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40∶5∶10∶0.4）为展开剂，展开，取出，晾干， 5%香草醛硫酸溶液为显色剂，加热至斑点显色清晰。铜锤白花片供试品与对芍药苷在薄层板相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图3。 　　2.3 龙血素b含量测定 　　2.3.1 色谱条件与系统适用性试验[4-8] 色谱柱为 Waters XTe