4微生物灭菌工艺精要.pptVIP

灭菌操作举例2 种子罐、发酵罐、计量罐、补料罐等的空罐灭菌及管道灭菌 从有关管道通入蒸汽，使罐内蒸汽压力达0.147MPa，维持45min； 灭菌过程从阀门、边阀排出空气，并使蒸汽通过达到死角灭菌； 灭菌完毕，关闭蒸汽，待罐内压力低于空气过滤器压力时，通入无菌空气保持罐压0.098MPa。 发酵制药 灭菌工艺 灭菌操作举例3 种子培养基实罐灭菌 发酵制药 灭菌工艺 从夹层通入蒸汽间接加热至80℃ 再从取样管、进风管、接种管进蒸汽，直接加热 关闭夹层蒸汽进口阀门，升温121℃，维持30min。 谷氨酸发酵的种子培养基实罐灭菌为12℃，维持2min。 灭菌操作举例4 发酵培养基实罐灭菌 夹层或盘管进蒸汽，间接加热90℃，关夹层蒸汽 取样管、进风管、放料管三路进蒸汽，直接加热至121℃，维持30min。 谷氨酸发酵培养基含有生物素等生长因子，实罐灭菌25℃，维持15min。 发酵制药 灭菌工艺 灭菌操作举例5 发酵培养基连续灭菌 一般培养基为130℃，维持5min。 谷氨酸发酵培养基为115℃，6~8min。 发酵制药 灭菌工艺 2.5.3 空气除菌操作工艺 好氧微生物需要氧气供应，通入空气。 连续一定流量的压缩无灰、无油、无水、无杂质的无菌空气。 空气流量：一般0.1-2.0。压强：0.2-0.4 MPa。 空气质量：相对湿度小于70％；比培养温度高2－30℃；洁净度20级，或失败率2－3。 1、发酵对空气的要求 发酵制药 灭菌工艺 2、工业制备大量空气的方法 加热灭菌：利用空气压缩时所产生的热量（达200℃）除菌，无菌化程度不高的发酵过程。 静电除菌：通过高压电流场，带电粒子被吸附。 介质过滤：捕集粒子及各种微生物。发酵工业采用 可靠，经济，方便。 发酵制药 灭菌工艺 3、空气除菌原理 空气中附着在尘埃上的微生物大小为0.5-5um。空气运动通过深层过滤介质时： 离心场作用：颗粒及其微生物沉降 直接被截留：颗粒惯性碰撞，相互集聚成大颗粒。气流速度越大，惯性越大，截留效果越好。 静电引力：微生物微粒带不同的电荷，与异性电荷吸引而沉降，有一定作用。 发酵制药 灭菌工艺 4、空气过滤介质 膜过滤介质：孔径小于被截留微生物体积 硝酸纤维酯、聚四氟乙烯、聚砜、尼龙膜，四氟乙烯、纤维素树脂微孔滤膜。孔径0.1-0.5um 深层过滤介质：空隙大于被截留微生物体积。 纤维状或颗粒状：棉花(16-20um直径，空隙20－50um)、玻璃纤维（18－19um）、活性炭 过滤纸：超细玻璃纤维纸(直径1-1.5um) 金属烧结管：单根或几十根甚至上百根金属微孔滤管安装在过滤器内。 发酵制药 灭菌工艺 粗过滤 压缩机 储罐 冷却器 丝网分离器 过滤器 5、空气灭菌工艺过程 I:空气预处理 II：除去空气中油和水 III：空气过滤 旋风分离器 加热器 发酵制药 灭菌工艺 （I）空气预处理 目的：提高空气的洁净度 措施： (1)高空取气，提高空气吸入口位置，采风塔高，设计流速8m/s。每升2m，空气杂菌降一个数量级。 (2)加强过滤，空压机吸入口前安装粗过滤器。流速0.1-0.5 m/s。 发酵制药 灭菌工艺 空气压缩机与空气储罐 空气压缩机：提供空气流动的动力。 往复式、螺杆式、涡轮式空压机。 ?空气储罐：消除压缩空气的脉动，用于往复式空压机。设置在空压站附近。 发酵制药 灭菌工艺 空气冷却器 作用：降温，除潮。 压缩机出口空气120－150℃，需要冷却至20－25℃。 分级冷却，两级串联使用。 第一级：循环水（30℃）冷却，至40－50℃ 第二级：低温水（9℃）或地下水（15－18℃）冷却，至20－25。设置在发酵车间外。 发酵制药 灭菌工艺 （II）除油除水－气液分离设备 除去空气中油和水：冷却空气湿度20％，形成油滴和水滴。 旋风分离器：空气速度15－25m/s。完全除去20um以上离子，对2um离子的分离效率为60－70％。 丝网除沫器：1um以上雾滴除去率98％ 发酵制药 灭菌工艺 （II）除油除水－空气加热设备 温度下降形成水滴：加热空气，30－35℃，降低相对湿度（从20％到70％以下），才能进入空气过滤器。 列管式换热器：空气走管程，蒸汽走壳程。 套夹式加热器：空气走管程，蒸汽走夹套。 发酵制药 灭菌工艺 （III）无菌空气—空气过滤器 实验室：一级过滤器；生产规模设置二、三级过滤器，第一级为总过滤器，二、三级为分过滤器。 绝对过滤器：微孔滤膜过滤器。 深层过滤器：棉花过滤器、超细玻璃纤维纸、石棉过滤、金属烧结管等。 发酵制药 灭菌工艺 无菌空气制备工艺小结 高空取气 分过滤器 粗过滤器 空气压缩机 储气罐 一级冷却器 油水分离器 二级冷却器 加热器 总过滤器 无菌空气 除油水器 发酵制药 灭菌工艺 了