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组织病理学实验室标准化.doc
组织病理学实验室的标准化
切片质量的好坏,直接影响对疾病的认识和判断,关系到对疾病的诊断和治疗。因此,做好每一份切片并保持优良的质量水平,具有重要的意义。为达到这一目的,应做好思想教育、业务培训和技术操作及质量控制标准化三方面工作,三者相互关联为一整体,不可偏废。由于涉及问题较多,以下仅就技术操作及质量控制标准化,促进质量提高方面进行简要介绍。
标准化是组织病理学实验室建设和发展的目标和方向之一。只有逐步达到并实现标准化才能满足现代化的需要,迎合时代的发展,更好地与国际接轨。技术操作及质量控制标准化,包括自接受标本到制成切片,以及以后的资料整理归档全过程的技术操作及质量控制工作,标准化是贯穿始终的一个主题。通过这一活动,可以及时解决切片质量存在的问题,提出改进措施,促进质量提高。如何开展标准化工作,应分以下几步进行。
一、技术操作及质量控制标准化
(一)制片前
制片前过程从标本送到实验室至包埋结束为止。包括:
1.标本的交接编号记录及检查
(1)实验室人员收检标本时人必须认真执行查对制度,包括:送检标本种类和数量与送检单上填写的是否一致;容器上的联号或姓名与送检单上是否符合;固定液的种类(通常要求为10%中性缓冲甲醛液)和量是否符合要求;送检单是否按规定用墨水笔逐项填写清楚。若发现有错误、疑问或不符合要求时,应立即查询清楚和适当处理,在合格后方可签名接收。如标本已干涸、腐败或其它明显不符则不应接收。接收标本应在初级人员接收后,再由中级人员和主检或具体负责人员复核,以确保没有差错发生。
(2)收到标本后应按标本顺序逐一在申请单上编上病理检查号,并在标本容器外壁贴上相应的号码,然后按号码先后顺序排列放好,再在申请单上打上收到日期。将收检的标本,按申请单逐一向负责处理的医师交代清楚,包括标本种类、数量、临床诊断及有无特殊注意事项等。
(3)取检过程中,实验室人员应认真记录填写好工作单,包括标本号、块(包)数、有无特殊处理、标本名称,如标本全取、标本过小等均应记录在案以备日后查对。对一些易碎、小而少的标本应用尼龙丝小袋或擦镜纸包裹好后再做上机处理,以防丢失。标本的取材块通常控制在2cm×2cm×0.3cm左右。标本取检多于一个包埋块者,在标本病理检查号后缀写-1或-2等,以便于查找校对。取好的标本应及时浸泡在指定的固定液中,来不及取完的标本特别是大标本应缝上号码投入固定池内以备次日再取。标本取检完后,自报告发出之日起,通常规定小标本保留1月以上,大标本保留6月以上。
(4)标本在上机处理之前,必须由初级和中级实验技术人员共同检查标本总数与申请单和工作单是否一致,确定无疑后方可上机处理。
2.标本的处理
利用全自动密闭式组织处理机处理。
(1)固定程序二道,固定液为10%中性缓冲甲醛液,时间为45min ,设置加温50℃,加压,搅拌。
(2)脱水程序八道,前四道为95%乙醇,后四道为100%乙醇,时间均为60min ,仅在最后一道的95%和100%乙醇设置加压、搅拌。
(3)透明程序二道,第一道为硬脂酸和石蜡,比例为3:2,第二道为硬脂酸和石蜡,比例为2:3,时间均为60min ,均设置加温65℃,加压,搅拌。
(4)浸蜡程序二道,均为56℃~58℃纯蜡,时间均为60min ,设置加温65℃,加压,搅拌。
所有试剂由专人负责定时检测定期更换,并做好详细记录。
3.标本的包埋
利用自动包埋中心处理。
首先清点检查标本,确认完好无缺后方可开始包埋操作,操作时应注意核对标本与工作单记录是否吻合。包埋的石蜡温度应尽量与标本浸蜡温度一致,大约控制在65℃~70℃之间,温度太低会造成包埋平面凹凸不平,尤其是内镜活检等小块标本,易出现切片不完整而发生漏诊现象。
包埋时,先取大小合适的不锈钢模型,注入蜡液置于热台上,液面刚好与模型的上缘平齐,不得低于或高于此限。取出包埋盒内的组织,校对正确后用干净的热镊子将所有组织悉数放入模型的底部,待组织与模型内的蜡液充分融合后,按要求排列后迅速移动模型至冷台,至底部石蜡刚开始凝固,用镊子轻压组织数秒,待组织埋平后,迅速盖上包埋盒注上蜡液,约过10sec~15sec,包埋盒与模型周边的蜡液凝固后,再次补充注入少许蜡液,以增加包埋盒的稳固性,注意液面高度不得高于包埋盒上缘,加盖包埋盒时一定要保持与模型底部平面平行,无前后左右倾斜的现象。待蜡块在冷冻台彻底冷却后,从模型内取出修去包埋盒周边多余的石蜡。清点包埋好的蜡块总数,按大小类别放好,冷冻备切。
(二)制片中
制片中过程从预备切片开始到封固切片为止。
1.每天切片之前
应先检查切片机的角度并将其调整固定,即刀座的角度约在10°,夹具的上下二边与刀刃平行,左右二边与刀刃垂直。预备切片和正式切片过程中所有角度均保持一致不得随意变动。
2.预备切
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