2DNA复制分析报告.ppt

第三章 DNA复制 (DNA Replication) 第一节 基本概念 第二节 原核生物DNA复制（E.coli） 第三节 真核生物DNA复制 第四节 DNA的修复 本节学习重点 半保留复制、半不连续复制、复制子、复制叉、引物、引发体、冈崎片段、滚环复制、D环复制 原核生物和真核生物复制的比较 一、DNA的半保留复制 （Semi-Conservation Replication） 第一节 基本概念 首先在15NH4Cl培养基中培养 然后转到14NH4Cl培养基中培养 只在15NH4Cl 中培养 只在14NH4Cl 中培养 14N对照系统 15N对照系统 第一代 第二代 提取DNA，进行密度梯度超离心 E.coli 细胞 用15N标记的亲本DNA 14N中第一次复制 14N中第二次复制 实验结果表明DNA复制是半保留复制 （a）密度梯度离心的DNA带 （b）对应于左侧DNA带的解释 Meselson-stahl 实验 复制起点：DNA复制由固定的起始点开始 富含AT 发夹结构 “呼吸作用”十分明显 AT rich 二、复制子和复制叉 生物体的复制单位称为复制子 从复制起始点到终止点的区域为一个复制子 复制叉（replication fork）：复制时双链DNA解开成两股链分别进行，使复制起点呈现叉子的形状 复制叉从复制起点开始沿DNA链连续移动 原核生物的复制起点通常在染色体的一个特定位点，并且只有一个起点，因此原核生物的染色体只有一个复制子 真核生物染色体可在多个位点起始复制，有多个复制起点，是多复制子，并在复制中融合为一体 复制起点处富含AT，便于解链 单、双向复制取决于起点处有一个还是两个复制叉 单向复制 双向复制 两种复制模式 （a）单向复制模式 （b）双向复制模式 DNA复制是双向进行的 大肠杆菌染色体DNA双向复制模式 复制起点 复制叉 复制叉 真核生物DNA复制有多个复制起点，同时双向复制 三、复制速度 真核生物基因组比原核大，染色体结构复杂，复制时需要解开核小体，复制后又需要重新形成核小体，其复制叉移动速度1000-3000bp/min，细菌的复制叉移动速度为50000bp/min 真核生物染色体DNA上有许多复制起点，可分段复制，实为多复制子的同步复制 四、原核生物几种复制方式 （1）θ复制：DNA在复制原点解开成单链，分别作为模板，各自合成互补链，出现2个叉状的生长点 （2）共价延伸方式（covalence elongation）或滚环式复 制（rolling circle replication） 由于复制时产生的滚环结 构形状象σ，又称σ复制 病毒、细菌因子 （3） 置换式 （Displacement form ） 又称 D 环复制 动物线粒体 DNA的复制方式 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * *