3_第三章糖蛋白分析报告.pptVIP

第三章 糖蛋白 3.1 糖复合物中常见的单糖及其衍生物 3.2 糖蛋白 3.1 糖复合物中常见的单糖及其衍生物 糖复合物的概念 糖基化作用 糖复合物中常见的单糖及其衍生物 1.糖复合物(glycoconjugate)：单糖、寡糖或多糖链在酶的催化下与蛋白质或脂类等非糖物质的特定部位共价结合形成的化合物，叫糖复合物。 糖复合物种类：糖蛋白、蛋白聚糖、脂多糖、糖脂等。 2.糖基化作用（glycosylation) ：单糖、寡糖或多糖链在酶的催化下与蛋白质或脂类等非糖物质的特定部位共价结合形成糖复合物的过程，叫糖基化作用 3.2 糖蛋白 4.2.1 糖蛋白通论 4.2.2 糖蛋白中糖链的结构特征 4.2.3 糖基化位点与肽链氨基酸序列 4.2.4 糖链的微观不均一性（糖型） 4.2.5 糖蛋白中糖链的代谢 3.2.6 糖链的生物学功能 4.2.7 两种糖蛋白介绍 3.2.1 糖蛋白通论 糖蛋白（Glycoproteins）的概念:自然界中分布最广的一类糖复合物，几乎所有的细胞都能合成糖蛋白，由短链寡糖与蛋白质共价相连而成。 分子大小：15--1000kDa 含糖量：少则不到5％，多达50％。 功能：复杂多样 3.2.2 糖蛋白中糖链的结构特征 糖链的结构简介 N-连接糖链（N-糖链） O-连接糖链（O-糖链） O-GlcNAc糖基化蛋白 1.糖链的结构简介 糖蛋白中寡糖链的还原端残基与多肽链的氨基酸残基形成两种糖肽键 N-糖肽键：糖的半缩醛羟基与肽链上的Asn的酰胺基团上的氨基形成N-糖肽键。 O-糖肽键：糖链上的半缩醛羟基与肽链上的Thr, Ser, HyPro, HyLys的羟基形成O-糖肽键； N-连接糖链（N-糖链）：以N-糖肽键相连的寡糖链 O-连接糖链（O-糖链）：以O-糖肽键相连的寡糖链 2.N-连接糖链（N-糖链） N-糖链的整体结构由两部分组成： 核心五糖区：变化少 N-糖链的外围链：在核心五糖区以外的非还原端，发生多种变化 根据N-糖链的外围链的不同，N-糖链又分为三类： 复杂型：根据连接的糖链的分支数又分为五类 高甘露糖型 杂合型 复杂型N-糖链结构的说明 单天线结构含量少； 二天线结构的两条分支链可以与核心五糖中的一个甘露糖相连；也可以分别与两个甘露糖相连； 复杂型N-糖链的中还可以连接其它多种单糖，如连接NeuAc（N-乙酰神经氨酸，唾液酸），L-Fuc,Gal等，有的还含有Galβ1→4GlcNAc的重复结构。 3、O-连接糖链（O-糖链） O-糖链的结构比N-糖链简单，但连接形式远比N-糖链多。 4.O-GlcNAc糖基化蛋白 该类蛋白有三个显著特点： 糖基化位点上只连接1个GlcNAc糖基 糖基化处于一种动态平衡中 仅存于细胞核和细胞质内 3.2.3 糖基化位点与肽链氨基酸序列 1、N-糖链糖基化位点与肽链氨基酸序列 与N-糖链相连的肽链氨基酸序列特征为： Asn-X-Ser或Asn-X-Thr(X残基是Pro外的氨基酸） 上述序列只是一个潜在的N-糖基化位点，是否糖基化还要看肽链的空间结构，一般上述序列多处于β－转角处时（在蛋白质分子表面），才可以糖基化 序列中的X为极性氨基酸残基时，糖链常为复杂型N－糖链；如X为非极性氨基酸残基时，糖链常为高甘露糖型N－糖链. 2、O-糖链糖基化位点与肽链氨基酸序列 特征结构序列不清； 糖基化位点多在蛋白质分子表面； 位点附近常出现Pro； Ser/Thr比较集中存在 与O-GalNAc连接糖链相连的氨基酸序列有; -T-X-X-X-,其中有1个X为Thr； -X-P-X-X-X-，其中有1个X为Thr； -X-X-T-X－，其中有1个X为碱性氨基酸； -S-X-X-X-，其中有1个X为Ser 。 3.2.4 糖链的微观不均一性（糖型） 糖链的微观不均一性（糖型）（glycoform)：生物体内出现的具有相同肽链和不同糖链结构的同种糖蛋白的现象。 糖型出现的原因：糖链自身合成的差异； 如牛胰核糖核酸酶（BP-RNase)有四种： BP-RNaseA:不含糖链 BP-RNaseB：在34位上的Asn连接有高甘露型的N-糖链； BP-RNaseC与BP-RNaseD：在34位上的Asn连接有复杂型的N-糖链； 糖链的微观不均一性（糖型）可表现为多种形式： 在同一糖基化位点连接不同糖链； 有的糖基化位点是非保守的位点； 有多个糖基化位点，但不是每一个糖基化位点都在任何情况下都被糖基化 3.2.5 糖蛋白中糖链的代谢 1.糖链合成的基本特点 糖基供体 糖基接受体 糖基转移酶 2.N－糖链的合成 3.O－糖链的合成 4.溶酶体酶的糖基化 5.糖链的降解 1.糖链合成的基本特点 糖基供体：合成糖链的单糖的活化形式有两种 磷酸长萜醇形式：长萜醇（d