青霉素类药物工业与检测方法分析报告.pptVIP

青霉素类药物工业分析与检测方法 生物工程一班 小组成员： 周春媛 庄超 戚嘉卓 * 抗生素类药物专题 第一部分： 青霉素类药物生产工艺 菌种优化 抗生素发酵及 提取精制 工业生产方法 及总的工艺 抗生素生产菌 的菌种 菌种来源 内 容 速 览 抗生素总的生产工艺过程 菌种 孢子制备 种子制备 发酵 发酵液预处理及过滤 出厂检验 提取过程 成品包装 精制过程 成品检验 微生物合成抗生素 下游： 提取 预处理 过滤 进一步提取 菌种保存、选育、孢子及种子制备 发酵——适宜的培养基 碳源 氮源 无机盐（微量元素） 前体 上游： 结晶干燥 纯品 成品: 制剂工作 ★发酵控制 1）发酵时间：视抗生素品种和发酵工艺而定。 2）溶 氧：在整个发酵过程中，需不断通无 菌空气和搅拌，以维持一定罐压或溶氧。 3）控制灌温：在罐的夹层或蛇管中需通冷却水以维持一定罐温。 4）消 泡： 加泡沫剂以控制泡沫，必要时还加入酸、碱以调节发酵液的pH。 成品检验 《中华人民共和国药典》 抗生素成品常规检验的主要项目有： ①鉴别实验：用化学或生物方法证明是何种抗生素； ②效价测定：测定有效成分的含量； ③毒性试验：限制产品中的致毒杂质 ⑤水分测定：限制过高水分以免影响稳定性； ④无菌实验：检查有无杂菌污染； ⑥pH测定：规定水溶液的酸碱度，保证产品稳定 和临床的安全应用； 第二部分：青霉素类药物的分析与检测 （一）、鉴别实验 一、化学结构与性质 1、化学结构 ①?? 青霉素类结构 N S R C O N H C H 3 C H 3 C O O H O 1 2 3 4 5 6 7 青霉素类: 氢化噻唑环或氢化噻嗪环与β-内酰胺并合的杂环，分别构成二者的母体：6-APA、 7-ACA。 母核: 由?-内酰胺环和氢化噻唑环 组成的双杂环。 6-APA 6-Aminopenicillanic Acid 侧链 : RCO-　　 2、性质 青霉素类和头孢菌素类结构共同特点具有?-内酰胺环。青霉素分子中都有一个游离羧基和酰胺侧链。 ①?? 酸性 有羧基，具有酸性 pKa值在2.5~2.8之间 与碱成盐如：青霉素G钠、青霉素G钾等 分子中游离羧基具有相当强的酸性，能与无机碱或某些有机碱形成盐。 其碱金属盐易溶于水，而有机碱盐难溶于水，易溶于甲醇等有机溶剂。 ②? 旋光性 青霉素分子中含有三个手性碳原子(C3，、C5、C6) 有手性碳原子，具有旋光性，根据此性质，可用于青霉素药物的定性和定量分析 ③紫外吸收特性 青霉素类 母核无明显UV多数有苯环取代基 ＊ 但青霉素类药物在弱酸性下水解，可以产生具有共轭双键的青霉烯酸，在紫外光区有吸收。 ＊ 侧链中有苯环等取代基的药物，在紫外光区也有吸收。像苄青霉素。 头孢菌素类分子中有共轭体系 （O＝C－N－C＝C） 在260nm处有最大吸收。 ④ 不稳定性 干燥条件下青霉素盐稳定。青霉素水溶液在pH6-6.8时较稳定。 β-内酰胺环是该类抗生素结构最不稳定的部分。 不稳定性因素：四元环张力大 ， 酰胺键易水解 青霉素类药物遇到某些氧化剂（酸、碱、青霉素酶，或某些金属离子）或遭遇某种温度，药物将降解失效。 二、青霉素类药物的鉴别反应 （一）官能团的呈色反应： 1、 羟肟酸铁反应：碱性环境中与羟胺作用β-内酰胺环破裂生成羟肟酸在稀酸中与高铁离子呈色 。 【鉴别】（1）取本品约20mg，加水15ml溶解后，加盐酸羟胺试液与氢氧化钠试液各2ml， 放置5分钟后，加盐酸溶液（1→100）3ml与三氯化铁试液1ml，随即振摇，即显赤褐色。 2、硫酸-硝酸呈色反应：头孢菌素能与硫酸-硝酸反应后呈黄色。此显色反应可区别某些头孢菌素族抗生素，因此被一些国家药典采用供鉴别。 3、茚三酮反应：α-氨基酸的反应,如氨苄西林遇茚三酮显蓝紫色 4、与斐林试剂反应：分子中具有(-CONH-)结构，可使碱性酒石酸铜还原显紫色, 5、变色酸-硫酸呈色反应：中国药典(1995年版)采用本法鉴别。如阿莫西林林加变色酸-硫酸试剂混合后，于150℃加热2-3min，因分解出甲醛与变色酸缩合而呈深褐色。 6、各种盐的反应：火焰反应在火焰下遇钾显紫色遇钠显淡黄色 青霉素族、头孢菌素族药品中，许多制成钾盐或钠盐供临床使用，因而可利用其火焰反应进行鉴别。 （二）沉淀反应 1、在稀盐酸中生成白色沉淀：青霉素钾(钠) 白色游离基沉淀 2、 有机胺盐的特殊反应： 侧链含有苯羟基基团时，能与重氮苯磺酸